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PTEN誘導(dǎo)假定激酶1(PINK1)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2023-03-13 12:44:45瀏覽次數(shù):440次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D1360 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant PTEN Induced Putative Kinase 1 (PINK1)
物種 Homo sapiens (Human,人)
PTEN誘導(dǎo)假定激酶1(PINK1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:接頭蛋白CrkL抗體 英文名稱:Crkl 0.2ml細胞色素P450 24A1抗體 英文名稱:CYP24A1 0.2ml銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 英文名稱:COMMD10 0.2ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:胎盤堿性磷酸酶樣蛋白2(ALPPL2)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental Like Protein 2 (ALPPL2)

產(chǎn)品名稱:4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶(ABAT)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant 4-Aminobutyrate Aminotransferase (ABAT)

產(chǎn)品名稱:含Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2 (Rock2)

產(chǎn)品名稱:11-β-羥基類固醇脫氫酶1(HSD11b1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 (HSD11b1)

產(chǎn)品名稱:/抗復(fù)合體(TAT)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

PTEN誘導(dǎo)假定激酶1(PINK1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1360

 

 

英文名稱:Recombinant PTEN Induced Putative Kinase 1 (PINK1)

BRPK; PARK6; Parkinson Disease(Autosomal Recessive)6; Serine/threonine-protein kinase PINK1, mitochondrial

型號:GOY-01D1360

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::線粒體, 細胞質(zhì)

預(yù)測分子量:30.6kDa

實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Lys262~Leu507 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:8.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

鋅指蛋白ZIC5抗體 ZIC5

鋅指脂蛋白-1c抗體 ZNF268

AN1型鋅指蛋白5抗體 ZFAND5

甲胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體 ZHX2

細胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體 ZDHHC16

鋅指蛋白754抗體 Zinc finger protein 754

鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體 ZFYVE27

受精卵抑制蛋白1抗體 ZAR1

γ-氨基丁酸A受體相關(guān)膜蛋白3 ZDHHC21

鋅指蛋白909抗體 ZBTB1

鋅指蛋白471抗體 ZNF471

鋅指蛋白420抗體 ZNF420

PTEN誘導(dǎo)假定激酶1(PINK1)重組蛋白人Cefradine 拉定1g瓶

Cis-Anethol 茴香腦104-46-120mg

L-Tyrosine L-25g瓶

Coumalic Acid 豆酸500-05-020mg

Vinorelbine 長春瑞濱71486-22-120mg

碘化丙錠PI溶液(1mg/ml)1ml支

20×SSPE PH7.4500ml瓶

Oleanolic acid 齊墩508-02-120mg

化羊抗豬IgG0.1ml支

anti-FLAG Tag Rabbit Polyclonal antibody100ul瓶

10ul袋裝短吸頭,20包/箱1000支包

Mayer’蘇木素染液(免疫組化)500ml瓶

 


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