糖原合酶激酶3α(GSK3a)重組蛋白小鼠

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

Serine/threonine-protein kinase GSK3A

型號(hào)：GOY-01D1386

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

內(nèi)分泌學(xué)

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：36.5kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ile122~Glu406 (Accession # Q2NL51) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：葡萄糖苷酸酶β(GUSb)活性蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Active Glucuronidase Beta (GUSb)

產(chǎn)品名稱：甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)2(MASP2)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Active Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

產(chǎn)品名稱：氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Active Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)

產(chǎn)品名稱：吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Active Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)

產(chǎn)品名稱：顆粒酶M(GZMM)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Active Granzyme M (GZMM)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

T淋巴細(xì)胞激活蛋白抗體 Sca1

促黃體激素誘導(dǎo)蛋白5抗體 STARD5

磷酸化S6核糖體蛋白抗體 Phospho-RPS6 (Ser235+Ser236)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Phospho-MEK4 (Ser257)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Phospho-MEK4 (Thr261)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Phospho-MEK4 (Ser257 + Thr261)

糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 SGK1

磷酸化磷酯酶Cβ3抗體 Phospho-PLC beta3 (Ser537)

鉀依賴鈉鈣交換蛋白6抗體 SLC6A19

精相關(guān)抗原17抗體 SPAG17

磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體 Phospho-SMC1(Ser957)

磷酸化多配體聚糖4(Ser179)抗體 phospho-Syndecan 4(Ser179)

糖原合酶激酶3α(GSK3a)重組蛋白小鼠免G1(IgG1)天然蛋白 英文名稱：Native Immunoglobulin G1 (IgG1)

人滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Tricine 三(羥甲) 甲10g瓶

Diosmetin 香葉木素520-34-320mg

Flumequine 氟甲喹42835-25-6100mg

SABC-POD0.1ml支

無(wú)粉乳膠手套小號(hào)盒

UACC-812(人腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Ginkgolic acids 銀杏酚酸20mg

6-Aminopenicillanic acid 6-氨基青霉烷酸25g瓶

Aflatoxin B2 黃曲B27220-81-71mg

L-Theanine L-茶10g瓶

L-Alanine L-56-41-7200mg