凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白小鼠 返回列表頁(yè)

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1)

MAP3-K5; MAP3K5; ASK1; MAPKKK5; MEKK5; Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase Kinase 5; MAPK/ERK kinase kinase 5

型號(hào)：GOY-01D1432

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：30.7kDa

實(shí)際分子量：31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu693~Arg933 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：8.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

胱天9(CASP9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Caspase 9 (CASP9)APAF3; ICE-LAP6; MCH6; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 9; Apoptotic protease-activating factor 3; ICE-like apoptotic protease 6物種：Mouse，小鼠

磷酸二酯酶12(PDE12)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphodiesterase 12 (PDE12)2'-PDE; 2'-Phosphodiesterase; Mitochondrial deadenylase物種：Mouse，小鼠

兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)酶與激酶物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

β淀粉樣肽/Aβ42抗體 beta-Amyloid(35-42) 0.1ml

植物凝集素IB4 plant lectin B4/IB4 0.2ml

腫瘤/抗原1B/1A Cancer/testis antigen 1B/1A 0.2ml

去泛素化酶3抗體 USP3 0.2ml

細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體 DACH1 0.2ml

/蛋白激酶SIK1抗體 Snf1lk/SIK1 0.2ml

信號(hào)通路Wnt2抗體 WNT2 0.2ml

減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 MEI-1 0.2ml

細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 CKAP4 0.2ml

DNA補(bǔ)充修復(fù)XPC細(xì)胞蛋白抗體 XPC 0.1ml

端粒酶相關(guān)蛋白2抗體（端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶） TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase 0.2ml

凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 CARD7/NALP1 0.2ml

凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白小鼠耗材

Benzamidine hydrochloride 芐瞇鹽酸鹽5g瓶

Lysozyme 5g瓶

Xylopentaose 木五糖49694-20-410mg

Potato Starch 馬鈴薯淀粉500g瓶

8-Gingerol 8-姜酚23513-08-820mg

Ni Sepharose H.P. 鎳-糖凝膠 H.P.25mL瓶

Stigmasterol 豆甾醇83-48-720mg

α-Cydodextrin α-環(huán)糊精250mg瓶

Isoquercitrin 異槲皮苷21637-25-220mg

Pimaricin 納他1g瓶

40%丙烯酰胺(19:1)100ml瓶