二酰甘油激酶α(DGKa)重組蛋白大鼠

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Diacylglycerol Kinase Alpha (DGKa)

DGK-A; DAGK; DAGK1; DGK-alpha; 80 kDa diacylglycerol kinase; Diglyceride kinase alpha

型號(hào)：GOY-01D1457

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：31.7kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Ala312~Glu557 (Accession # P51556) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：8.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

羧肽酶Z(CPZ)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Carboxypeptidase Z (CPZ)酶與激酶物種：Human，人

鈣11(CAPN11)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Calpain 11 (CAPN11)Calcium-activated neutral proteinase 11物種：Human，人

神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Enolase, Neuron Specific (NSE)ENO2; Enolase 2; Gamma Enolase; 2-phospho-D-glycerate hydro-lyase; Neural enolase物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2(Ser94) 0.1ml

口蹄疫病毒A型抗體 FMDV Polyprotein (VPg2 protein) 0.2ml

溴脫氧尿苷單克隆抗體 BrdU(A7) 0.1ml

磷酸化γ連環(huán)蛋白抗體 phospho-JUP(Tyr550) 0.1ml

NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體 CD158b2 0.2ml

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體 CEAcam8/CD67 0.2ml

細(xì)胞間粘附分子-3抗體 ICAM-3/CD50 0.1ml

細(xì)胞角蛋白1抗體 CK1 0.1ml

血小板源性生長(zhǎng)因子C抗體 PDGFC/VEGF E 0.2ml

半雙加氧酶1抗體 CDO1 0.2ml

DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體 DDB2 0.1ml

膠質(zhì)細(xì)胞運(yùn)載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮細(xì)胞運(yùn)載蛋白) EAAT3 0.1ml

二酰甘油激酶α(DGKa)重組蛋白大鼠Curcumin 姜黃素5g瓶

碘化丙錠PI溶液(1mg/ml)10×1ml套

普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain，伊紅法)2×50ml瓶

核酸助沉劑1ml瓶

移液器架(圓型)七支槍個(gè)

伊紅染液100ml瓶

Dexamethasone 100mg支

Ionomycin calcium salt 鈣離子10mg瓶

(R)-(+)-Corypalmine D-四氫藥根堿13063-54-220mg

Uricase 尿酸酶1KU瓶

Sodium phytate 植酸鈉14306-25-320mg