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溶血磷脂酶Ⅱ(LYPLA2)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號

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更新時間:2023-03-20 10:42:34瀏覽次數(shù):240次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2425 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Lysophospholipase II (LYPLA2)
物種 Homo sapiens (Human,人)
溶血磷脂酶Ⅱ(LYPLA2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:肌營養(yǎng)蛋白α抗體 英文名稱:Dystrobrevin alpha 0.2ml多巴胺β羥化酶抗體 英文名稱:DBH 0.1mlDNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 英文名稱:Dnmt1 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

纈氨酰tRNA合成酶(VARS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Valyl tRNA Synthetase (VARS)G7A; VARS2; ValRS; Valine tRNA Ligase 1,Cylasmic; Protein G7a物種:Mouse,小鼠

解整合素金屬33(ADAM33)重組蛋白英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 33 (ADAM33)C20orf153; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 33物種:Human,人

肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)CKB; CKBB; CK-B; CK-1; Creatine Kinase, Brain物種:Mouse,小鼠

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

溶血磷脂酶Ⅱ(LYPLA2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2425

 

 

英文名稱:Recombinant Lysophospholipase II (LYPLA2)

APT-2; LPL-II; Acyl-protein thioesterase 2

型號:GOY-01D2425

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì), 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測分子量:24.5kDa

實(shí)際分子量:24kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Met1~Thr196 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基淡天藍(lán)鏈霉菌 Streptomyces coerulesscens

瑞他帕林;瑞他莫林 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Retapamulin

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糖(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Lactulose

 中性紅染色液側(cè)耳 Pleurotus sp.

土大黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rhapontin

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 大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

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 屎腸球菌 Enterococcus faeciumHBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系

葉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Folic acid

 中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii煙曲霉 Aspergillus fumigatus

葡萄糖鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:檢查 Calcium gluconate

 NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

雙羥萘噻(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Pyrantel pamoate

溶血磷脂酶Ⅱ(LYPLA2)重組蛋白人大鼠可溶性CD23(sCD23)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

β羥丁酸(βOHB)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

C肽(C-Peptide)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

牛高密度脂蛋白(HDL)免疫試劑盒

豬白介素13(IL-13)免疫試劑盒

20次 一站式MBP標(biāo)簽蛋白純化套裝 One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack 介質(zhì)需4℃保存,PMSF需-20℃保存

15次 非DNA清除劑-2 DNA Erasol-2 4℃保存

小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)免疫試劑盒

2 ug pHCMC04 pHCMC04 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

5g 腺 Adenine 常溫保存

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