鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白小鼠

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Sphingosine Kinase 2 (SPHK2)

酶與激酶

型號：GOY-01D2697

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：26.2kDa

實際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Gly18~Leu219 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：8.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Phospholipase A2, Group XIIB (PLA2G12B)產(chǎn)品名稱：ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)重組蛋白物種：Human，人PLA2G13; FKSG71; GXIIB; Phospholipase A2,Group XIII; Group XIIB secretory phospholipase A2-like protein

Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)產(chǎn)品名稱：肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白物種：Human，人CKB; CKBB; CK-B; CK-1; Creatine Kinase, Brain

Recombinant Tankyrase 1 Binding Protein 1 (TNKS1BP1)產(chǎn)品名稱：端錨聚合酶1結(jié)合蛋白1(TNKS1BP1)重組蛋白物種：Human，人TAB182

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

尼氏(Nissl)染色液規(guī)格：

己二二異丁酯(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) Diisobutyl Adipate

 大鼠腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL

己二二酯(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) Dipropyl Adipate

 中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

己二雙(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) Bis(2-butoxyethyl) Adipate

 屎腸球菌 Enterococcus faecium

壬二二甲酯(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) Dimethyl Azelate

 NCI-H2227(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2

油乙酯(>70.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(GC) Ethyl Oleate

 大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL

油乙酯(>95.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) Ethyl Oleate

 奇異變形桿菌 Proteus mirabilis

癸二二丁酯(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) Dibutyl Sebacate

 凍膠假絲酵母 Candida gelida

癸二二甲酯(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) Dimethyl Sebacate

鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白小鼠25g L- 鹽酸鹽 L-Histidine HCl    室溫干燥保存

人胍基丁胺脲水解/凝集(AGMAT)免疫試劑盒

明膠蛋白胨 Gelatin Peptone 250g

甲型流感H5N1(Avian Flu)HA 免疫試劑盒

人鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50mL 肝素瓊脂糖 Heparin Agarose  4℃保存

25g DEAE葡聚糖凝膠 A-25 DEAE-Sephadex A-25 -20℃保存

5次 大提柱式質(zhì)粒 DNAout  Maxi Column  Plasmid  DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

兔子基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒進口、組裝

白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)免疫試劑盒

小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒進口、組裝