詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
Lipidosin蛋白(LPD)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2740 |
英文名稱:Recombinant Lipidosin (LPD)
ACSBG1; BG1; BGM; GR-LACS; hBG1; hsBG; Bubblegum; Very Long-Chain Acyl-CoA Synthetase; Acyl Coenzyme A Synthetase Bubblegum Family, Member 1
型號:GOY-01D2740
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預測分子量:34kDa
實際分子量:44kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Asn271 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:5.7
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)產(chǎn)品名稱:周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白物種:Rat,大鼠PSSALRE; CDKN5; Cell division protein kinase 5; Serine/threonine-protein kinase PSSALRE; Tau protein kinase II catalytic subunit;TPKII catalytic subunit
Recombinant Carboxypeptidase A5 (CPA5)產(chǎn)品名稱:羧肽酶A5(CPA5)重組蛋白物種:Human,人酶與激酶
Recombinant Glucuronidase Beta (GUSb)產(chǎn)品名稱:葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白物種:Rat,大鼠GUS-B; MPS7; Beta-G1
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠淋巴瘤細胞英文名稱:EL4
奧昔康唑 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Oxiconazole
A-375(人惡性黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
土半鈣鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Oxytetracycline hemicalcium salt
AC肉湯/通用培養(yǎng)肉湯/AC Broth用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗250克國產(chǎn)/進口
α-Apo-土 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 α-Apo-oxytetracycline
神經(jīng)母細胞瘤英文名稱:M17
β-Apo-土 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 β-Apo-oxytetracycline
人腺導管細胞英文名稱:MDA-MB-435S
二水合土 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Oxytetracycline Dihydrate
Rustigian氏尿素培養(yǎng)液/ Rustigian氏尿素肉湯/Rustigian Urea Broth細菌尿素酶試驗100克國產(chǎn)/進口
4-差向土 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 4-Epioxytetracycline
人黑色素瘤細胞英文名稱:MV3
6α-羥基 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 6α-Hydroxy Paclitaxel
Hep B1.2(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)paclitaxel
Lipidosin蛋白(LPD)重組蛋白小鼠RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基(2015藥典) RV Salmonella Enrichment Medium 250g
5g 戊鈉 Pentobarbital Sodium Salt 室溫保存
2 ug pProEX-c pProEX-c 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pLVX-ZsGreen1-C1 pLVX-ZsGreen1-C1 低溫運輸,-20℃保存
倉鼠細胞色素P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)免疫試劑盒進口、組裝
5g 4- 氯 -1- 萘 4-Chloro-1-Naphthol(4-CN) -20℃保存
250mL Blocking Reagent with Triton X-100 & Sheep Serum Blocking Reagent with Triton X-100 & Sheep Serum 常溫保存
假單胞分離瓊脂 Pseudomonas Isolation Agar 250g
人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)免疫試劑盒進口、分裝
2mL 醛基磁珠 Magnetic beads,Aldehydic 4℃密閉、豎直保存
豬降鈣素原(PCT)免疫試劑盒進口、組裝