詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
顆粒酶A(GZMA)活性蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D3081 |
英文名稱:Active Granzyme A (GZMA)
CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1
型號(hào):GOY-01D3081
酶與激酶
感染免疫
免疫分子
物種:Homo sapiens (Human,人)
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):9.2
應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
中文名稱100:胃原A(PGA)重組蛋白產(chǎn)品名稱:Recombinant Pepsinogen A (PGA)
Recombinant Corin (CRN)產(chǎn)品名稱:Corin蛋白(CRN)重組蛋白物種:Human,人ATC2; CRN; Lrp4; TMPRSS10; Atrial Natriuretic Peptide-Converting Enzyme, Serine Protease; Heart-specific serine proteinase ATC2; Pro-ANP-converting enzyme
Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 1 (PDK1)產(chǎn)品名稱:丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1)重組蛋白物種:Rat,大鼠[Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase isozyme 1, mitochondrial
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小檗堿規(guī)格:1g/支;98%
小白菊內(nèi)酯;Parthenolide 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
3% NaC1氨基脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
熊去氧膽;Ursodeoxycholi 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
NAC培養(yǎng)基/NAC Agar Medium假單胞菌屬分離培養(yǎng)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
血根堿;Sanguinarine 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
人腎細(xì)胞腺細(xì)胞英文名稱:ACHN
柚皮甙二氫查爾;Naringin di 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:HCT-15
香葉木素;Diosmetin 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
動(dòng)力-硝鹽培養(yǎng)基發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
仙茅苷;Curculigoside 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
金黃地鼠膚成纖維細(xì)胞英文名稱:GHS1
腺苷;Adenosine 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
鎂孔雀綠增菌液/鎂孔雀綠肉湯/RV肉湯/MM,RV Medium沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
西貝母堿;Imperialine 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
顆粒酶A(GZMA)活性蛋白人1mL 秋水仙素溶液 Colchicine Solution 常溫保存
2 ug pTet-Off pTet-Off 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50T 人白血病μ-BCR-ABL融合基因PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
白γ-1 鏈C 區(qū)(IGHGI)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠總膽汁酸(TBA)免疫試劑盒
馬去素(NE)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人胱抑素SN(CST1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒
500mL Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X 常溫保存
人腺病毒IgG(ADV-IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
100mL TAPS Buffer,0.2M,pH8.0 TAPS Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存