免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品分類 | 抗體來源 |
異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體 | 50ul、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規(guī)格 50ul 100ul 200ul
產(chǎn)品分類 抗體 / 一抗
英文名稱 :IDH3B
英文別名 :FLJ11043; H-IDHB; IDH3B; IDH3B_HUMAN; Isocitrate dehydroase [NAD] subunit beta; Isocitrate dehydroase [NAD] subunit beta, mitochondrial; isocitrate dehydroase 3, beta subunit; Isocitric dehydroase; Isocitric dehydroase subunit beta; MGC903; mitochondrial; NAD(+)-specific ICDH; NAD(+)-specific ICDH subunit beta; NAD+-specific isocitrate dehydroase b subunit; NAD+-specific isocitrate dehydroase beta; OTTHUMP00000030023; OTTHUMP00000030024; RP46.
交叉反應(yīng) :Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
標(biāo)記 :Unconjugated
抗體來源:Rabbit
抗體類型:Polyclonal
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human IDH3B
蛋白細(xì)胞定位:細(xì)胞漿
純化方法:affinity purified by Protein A
亞型:IgG
性狀:Liquid
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 :
Isocitrate dehydroases catalyze the oxidative decarboxylation of isocitrate to 2-oxoglutarate. These enzymes belong to two distinct subclasses, one of which utilizes NAD(+) as the electron acceptor and the other NADP(+). Five isocitrate dehydroases have been reported: three NAD(+)-dependent isocitrate dehydroases, which localize to the mitochondrial matrix, and two NADP(+)-dependent isocitrate dehydroases, one of which is mitochondrial and the other predominantly cytosolic. NAD(+)-dependent isocitrate dehydroases catalyze the allosterically regulated rate-limiting step of the tricarboxylic acid cycle. Each isozyme is a heterotetramer that is composed of two alpha subunits, one beta subunit, and one gamma subunit. The protein encoded by this e is the beta subunit of one isozyme of NAD(+)-dependent isocitrate dehydroase. Three alternatively spliced transcript variants encoding different isoforms have been described for this e. [provided by RefSeq, Jul 2008]. |
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Protein Kinase, X-Linked (PRKX)產(chǎn)品名稱:X-連鎖蛋白激酶(PRKX)重組蛋白物種:Rat,大鼠PKX1; cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit PRKX
Recombinant Deoxythymidylate Kinase (DTYMK)產(chǎn)品名稱:脫氧胸苷酸激酶(DTYMK)重組蛋白物種:Mouse,小鼠CDC8; TMPK; TYMK; Thymidylate Kinase; dTMP Kinase
Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬15(MMP15)重組蛋白物種:Pig,豬SMCP-2; MTMMP2; MT2-MMP; Membrane-Inserted; Membrane-type matrix metalloproteinase 2; Membrane-type-2 matrix metalloproteinase
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 50x)100ml國產(chǎn)
橙花;Nerol 規(guī)格: 0.1ml 訂購|咨詢
小鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
長梗秦艽;Waltonitone 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1
常山乙素;Febrifugine 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
長春瑞濱;Vinorelbine 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
199培養(yǎng)基/M199培養(yǎng)基/M199 Medium細(xì)胞培養(yǎng)用500ml/10升國產(chǎn)/進(jìn)口
車葉草苷;Asperuloside 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
人食管細(xì)胞英文名稱:KYSE30
草;Oxalic acid 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
MS培養(yǎng)基(含維生素)/MS Medium with vitaminsBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
橙黃決明素-6-葡萄糖苷; 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
人結(jié)直腸腺上細(xì)胞英文名稱:DLD-1
次大風(fēng)子素;Hydnocarpin 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
魚類白介素1α(IL-1α)免疫試劑盒
兔子蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
100次 總抗氧化能力檢測試劑盒(FRAP法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
2×0.5mL 蛋白抑制劑混合液 Protease Inhibitor Cocktail -20℃保存
布魯氏菌培養(yǎng)基 Brucella Agar 250g
豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
馬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
人組織多肽特異性抗原(TPS)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人鞘脂激活蛋白原(PSAP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝