一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設(shè)計一般是二抗帶上可檢測標(biāo)記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
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中文名稱 | 白細(xì)胞介素增強(qiáng)子結(jié)合因子3抗體 |
英文名稱 | ILF3 |
規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
產(chǎn)品分類 | 抗體 / 一抗 |
英文別名 CBTF; Double stranded RNA binding protein 76; Double-stranded RNA-binding protein 76; DRBF; DRBP76; ILF3; ILF3_HUMAN; Interleukin enhancer binding factor 3; Interleukin enhancer-binding factor 3; M phase phosphoprotein 4; M-phase phosphoprotein 4; MPHOSPH4; MPP4; NF AT 90; NF-AT-90; NF110; NF90; NFAR; Nuclear factor associated with dsRNA; Nuclear factor of activated T cells 90 kDa; Nuclear factor of activated T-cells 90 kDa; TCP80; Translational control protein 80
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, GuineaPig
標(biāo)記 Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ILF3
蛋白細(xì)胞定位 細(xì)胞核
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 This gene encodes a double-stranded RNA (dsRNA) binding protein that complexes with other proteins, dsRNAs, small noncoding RNAs, and mRNAs to regulate gene expression and stabilize mRNAs. This protein was first discovered to be a subunit of the nuclear factor of activated T-cells (NFAT); a transcription factor required for T-cell expression of interleukin 2. NFAT is a heterodimer of 45 kDa and 90 kDa proteins, the larger of which is the product of this gene. These proteins have been shown to affect the redistribution of nuclear mRNA to the cytoplasm. Knockdown of NF45 or NF90 protein retards cell growth; possibly by inhibition of mRNA stabilization. In contrast, an isoform (NF110) of this gene that is predominantly restricted to the nucleus has only minor effects on cell growth when its levels are reduced. Alternative splicing results in multiple transcript variants encoding distinct isoforms.[provided by RefSeq, Nov 2008]
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備 | 2. 免疫動物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。 | 常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。 3. 免疫血清的收集 一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。 | 純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化 ,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有 高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要 鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、 純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建 議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。 |
抗體作用:
1、中和毒素和阻止病原體入侵,抗體在體外可發(fā)生各種抗原、抗體結(jié)合反應(yīng),有利于抗原或抗體檢測、功能判斷,在體內(nèi)可中合毒素、阻斷病原體入侵、清除病原微生物。
2、激活補(bǔ)體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物,使細(xì)胞溶解破壞,抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能。
3、調(diào)理吞噬和抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用,調(diào)理作用是指IgG抗體的FC段與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面下段FC受體結(jié)合,從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用??贵w依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用是指具有殺傷活性的細(xì)胞,如NK細(xì)胞,通過其表面的FC受體,識別包被于靶細(xì)胞表面抗原上的抗體FC段,直接殺傷靶細(xì)胞。
4、介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)。
5、穿過胎盤屏障和黏膜,IgG是能夠通過胎盤的抗體,對于新生兒的抗感染具有重要意義。
6、分泌型的IgA可通過呼吸道和消化道黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。
優(yōu)勢:
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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