詳細(xì)介紹
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱 紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP*
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 RFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-RFP*運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
90207-10 JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
90208-10 SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
90211-100 低載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
90211-50 低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90212-100 高載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
90212-50 高載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90301-25 RNA 級 Oligo(dT) 纖維素 25mg
90302-5 MgCl2溶液,25mM,PCR 級 5mL
90303-1 硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 ) 1套
90306A-100 胰酶消化液 ( 含 EDTA) 100mL
90306B-100 胰酶消化液 ( 無 EDTA) 100mL
90307-100 青鏈霉素溶液 100mL
90308-25 親和硅烷 25mL
90309-100 紅細(xì)胞裂解液 B 型 ( 流式細(xì)胞分析用 ) 100mL
90311-100 Tricine 干粉,電泳級 100g
90313-250 TBE 電泳液 ,10× 250mL
90313-2500 TBE 電泳液 ,10× 2500mL
90314-50 柱式尿液 DNAout 50 次
90315-100 非凍型尿液 DNA 保存液 100mL
90315-15 非凍型尿液 DNA 保存液 15mL
90317-30 一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝 30 次
90318-50 柱式 DNA 清除劑 50 次
90402-50 蛋白膠微量回收試劑盒 50 次
90403-5 蛋白膠中量回收試劑盒 5次
90404-50 柱式植物 RNAout 2.0 50 次
90407A-5 lambda(λ)DNA 5μg
90407B-5 lambda(λ)DNA 5μg
90407C-5 lambda(λ)DNA 5μg