詳細(xì)介紹
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;MDA-MB-435S價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;MDA-MB-435S價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;MDA-MB-435S價(jià)格【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;MDA-MB-435S價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 MDA-MB-435S是一種紡錘形的細(xì)胞,1976年由其親本(MDA-MB-435)中篩選得到。MDA-MB-435是從一名31歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導(dǎo)管腺癌女性患者胸水中分離得到的。但近來(lái)證明MDA-MB-435細(xì)胞被M14黑色素瘤細(xì)胞污染。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:12;D16S539:13;D18S51:13,17;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:19,24;D3S1358:14,20;D5S818:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:13;FGA:21;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:16,18;
同工酶
染色體 55~58
使用權(quán)限 A類
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;MDA-MB-435S價(jià)格細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
140635-500 XTT 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 500 次
140376-10 XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
12-260 XL1-Blue 菌種 1mL
90504-10 XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
140431-10 XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞 0.1 mL×10
12-261 XL-10 gold 菌種 1mL
17-0250 XhoI 2000U
80910-10 X-Gal 溶液,20mg/mL 10mL
100885-0.5 X-Gal 干粉 0.5g
17-0240 XbaI 1500U
120507-25 Xa 因子蛋白酶 25μg
120507-50 Xa 因子蛋白酶 50μg
12-213 X33 酵母菌種 1mL
120608B-1 X 光片 (8×10 英寸 ) 1盒
120608A-1 X 光片 (5×7 英寸 ) 1盒
130866-100 WST-1 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 100 次
23-0830-0.5 Wortmannin(PI3K 抑制劑 ) 0.5mg
131205-10 WGA 糖蛋白分離試劑盒 10 次
P002-1 Western 雜交技術(shù)服務(wù) 1 張膜
81211-250 Western 印跡膜洗膜液 250mL
80813-50 Western 印跡膜抗體清除劑 50mL
80813-200 Western 印跡膜抗體清除劑 200mL
81210-100 Western 印跡膜封膜液 (NC 膜和 PVDF 膜 ) 100mL
100878-100 Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 ) 100mL
131104-500 Western 封堵液 500mL
12-210 WB600 枯草宿主菌菌種 1mL