詳細(xì)介紹
柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次*使用方法:
一、準(zhǔn)備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺(tái)面和器皿(詳見該產(chǎn)品的使用手冊(cè))。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶,立即使用。注意:放置時(shí)間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計(jì)所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會(huì)溶解在這少量溶液中)。充分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分。
后續(xù)處理:
1. 染色觀察:將凝膠一面的玻璃板揭開,直接用仍然附著在另一玻璃板上的凝膠進(jìn)行各種染色,包括銀染(固定、漂洗、顯影和定影等步驟)、EB(每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液)、天澤基因低毒核酸染料 DNAgreen(每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液)。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后進(jìn)行膠回收處理。
3. Northern 雜交:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后電轉(zhuǎn)移到帶正電的尼龍膜上,然后進(jìn)行雜交處理。
4. 放射自顯影:如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過同位素標(biāo)記,則將凝膠一面的玻璃板揭開,用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來,然后包上保鮮膜,真空抽干,然后使膠跟 X 光片向?qū)χ眠M(jìn)行放射自顯影。
柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次*產(chǎn)品及特點(diǎn):
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了實(shí)驗(yàn)人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對(duì)長(zhǎng)度各異的 RNA 進(jìn)行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次*產(chǎn)品介紹:
131050-10 去垢劑去除樹脂 10mL
CAS9036-19-5 曲拉通 X-114 100mL
CAS9002-93-1 曲拉通 X-100 100mL
130519-2 巰基磁珠 2mL
100301-1 秋水仙素溶液 1mL
CAS64-86-8 秋水仙素 100mg
CAS9012-36-6 瓊脂糖凝膠 4B 100mL
CAS9050-94-6 瓊脂糖凝膠 2B 100mL
81105-100 瓊脂糖 100g
CAS9012-36-6 瓊脂糖 100g
CAS9002-18-0 瓊脂粉 100g
120698-10 青霉素 G 鈉鹽溶液 10mL
CAS69-57-8 青霉素 G 鈉鹽 1g
120697-1 青霉素 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL 1 Mu
CAS113-98-4 青霉素 G 鉀鹽 1Mu
90307-100 青鏈霉素溶液 100mL
131085-10 親和素 10mg
CAS1405-69-2 親和素 1mg
90308-25 親和硅烷 25mL
140649-1 親和層析柱 1 mL
140650-1 親和層析柱 3 mL
110809-1 親和層析柱 6 mL
140651-1 親和層析柱 12 mL
140652-1 親和層析柱 30 mL
140653-1 親和層析柱 50 mL
18-0460-48 羥脯氨酸測(cè)試盒( 堿水解法 )( 測(cè)動(dòng)物血清、組織、尿液 ) 48 T
18-0470-48 羥脯氨酸測(cè)試盒 ( 消化法 )( 測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液 ) 48 T
CAS127-07-1 羥基脲 1g
121105-100 茜素紅 S 染色試劑盒 100mL