詳細介紹
人肺癌細胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人肺癌細胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | 人肺癌細胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱 人肺癌細胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu*
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:8傳代;每周2~3次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人肺癌細胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu*運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
地奧司明 英文名稱: Diosmin CAS: 520-27-4 分子式: C28H32O15 608.54 20mg
香葉木素 英文名稱: Diosmetin CAS: 520-34-3 分子式: C16H12O6 300.26 20mg
丹參酮Ⅰ 英文名稱: Tanshinone I CAS: 568-73-0 分子式: C19H18O3 294.34 20mg
丹參酮IIA磺酸鈉 英文名稱: Tanshinone IIA-sulfonic sodium CAS: 分子式: C19H17O3•SO3Na 396.39 20mg
丹參酮IIA 英文名稱: Tanshinone IIA CAS: 568-72-9 分子式: C19H18O3 294.34 20mg
丹參素鈉 英文名稱: Sodium danshensu CAS: 67920-52-9 分子式: C9H9O5.Na 220.155 20mg
人肺癌細胞/5Fu耐藥株;A549-5Fu*Mildronate米屈肼76144-81-5
2,6-Pyridinedimethanol2,6-吡啶二醇1195-59-1
N-Boc-L-tert-LeucineN-Boc-L-叔亮氨酸62965-35-9
N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamideN,O-雙三硅基乙酰胺10416-59-8
Glycidaldehyde diethylacetal環(huán)氧丙縮二乙醇13269-77-7