原代細胞分析之全攻略

原代細胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)NanoString Technologies的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，細胞群體的RNA平均表達水平不一定與群體中單個細胞的RNA表達相同。例如，有些基因持續(xù)在低水平表達，而另一些則在短時間內(nèi)大量表達。對宏觀測定而言，這樣的表達模式被平均化。

該公司*的數(shù)字表達譜分析系統(tǒng)能直接對單個RNA分析進行計數(shù)，zui多可分析單細胞中的800個不同分子。這是利用nCounter Single Cell Gene Expression Assay中的分子條形碼來實現(xiàn)的，它識別特定的RNA分子。單細胞樣品在裂解后，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄和預(yù)擴增，隨后與分子條形碼雜交，純化后在nCounter®分析儀上讀取。

哈佛大學(xué)的Hongkun Park研究小組與Broad研究院的Aviv Regev研究小組合作，來研究看似均質(zhì)細胞中的基因表達異質(zhì)性1。Park、Regev及其同事利用一種稱為Smart-Seq的技術(shù)，來讀取RNA轉(zhuǎn)錄本的覆蓋。與原先的RNA-Seq方法相比，Smart-Seq讓研究人員能夠更詳細了解mRNA選擇性剪接所產(chǎn)生的異構(gòu)體，同時更好地鑒定單核苷酸多態(tài)性（SNP）。

通過計算機分析，Regev和Park發(fā)現(xiàn)，mRNA豐度和剪接模式都存在之前未觀察到的雙峰（bimodal）變化，并通過RNA-熒光原位雜交（FISH）對精選轉(zhuǎn)錄本進行了驗證。如今，他們正在擴展樣品類型。Park談道：“目前我們正將原代細胞RNA-Seq方法應(yīng)用在各種免疫細胞、神經(jīng)細胞和癌癥細胞上，以便了解驅(qū)動細胞之間變化的因素、這種變化的動力學(xué)及其生物學(xué)影響。”

 H-ras/Ras/Ras p21 磷酸化周期素E抗體

 Hrasls3/HREV107 磷酸化周期素E抗體

 HRG Beta1 磷酸化周期素B1抗體

 HRG-alpha 磷酸化周期素B1抗體

 HRH3/GPCR97 磷酸化周期素B1抗體

 HRH4/GPCR105 磷酸化周期素B1抗體

 HSA 磷酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體

 HSA 磷酸化腫瘤易感候選基因3抗體

 HSA 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體

 HSD11B1/HSD1 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體

 HSD11B2/HSD2 磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

 HSD17B1 磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

 HSD17B2 磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體
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