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細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶的顯示

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(一)原理過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。

(二)方法1.取小鼠一只,以頸椎脫位法將其處死,迅速剖開其后肢暴露出股骨,將股骨一端斜向剪斷,用PBS緩沖液濕潤過的注射器針頭吸出骨髓一滴滴到載玻片上。2.推片,室溫晾干。3.將涂片放入0.5%硫酸銅中浸30秒~1分鐘。4.取出涂片直接放入聯(lián)苯胺混合液中反應(yīng)6分鐘。5.清水沖洗,放入1%番紅溶液中復(fù)染2分鐘。6.清水沖洗,室溫晾干。7.鏡檢或封片后鏡檢。

(三)結(jié)果涂片中可見一些細(xì)胞中存在著藍(lán)色或棕色顆粒,為過氧化物酶所在位置。

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