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少量細胞標本的制備實驗步驟
閱讀:149 發(fā)布時間:2017-6-27提 供 商 | 上海研生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 4.4KB |
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少量細胞標本的制備實驗步驟
(1)取材:少量細胞連同培養(yǎng)基一起移人離心管中,800r/min離心5min。細胞沉淀加4%的多聚甲醛,輕輕混勻4℃固定1h。PBS緩沖液漂洗,800r/min離心5min,連續(xù)3次。將微量移液管的塑料槍頭過火焰,使其成為封閉的錐形管,將細胞沉淀(約200μl)移入管內(nèi),加5μl新鮮人血漿,輕輕混勻后,然后加入2.5%戊二醛(pH 7. 2~7.3。0.1moL/L PBS緩沖液配制)100μl,再輕輕混勻,4℃靜止4h。離心條件同前。刀片切去槍頭的末端,用細針挑出細小的細胞團塊,PBS緩沖液漂洗多次。
(2)固定:1%鋨酸固定2h,PBS緩沖液漂洗、丙酮脫水,包埋,染色,切片自然干燥后觀察。
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