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原代細(xì)胞生長(zhǎng)的檢查方法
閱讀:315 發(fā)布時(shí)間:2018-3-21原代細(xì)胞是zui簡(jiǎn)單的檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。計(jì)數(shù)細(xì)胞一般利用臺(tái)盼藍(lán)(錐蟲藍(lán)染色,臺(tái)盼藍(lán)(錐蟲藍(lán))不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色。而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增高,可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色。因此,鏡下未染色細(xì)胞認(rèn)為是活細(xì)胞,而染色細(xì)胞認(rèn)為是死亡細(xì)胞。
經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)常用到血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。細(xì)胞消化成單個(gè)細(xì)胞后,將細(xì)胞懸液加入血蓋片和計(jì)數(shù)板之間的空隙中,通常我們計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)板的四角大方格(每個(gè)大方格又分16個(gè)小方格)內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。計(jì)完數(shù)后,需換算出每ml懸液中的細(xì)胞數(shù)。由于計(jì)數(shù)板中每一方格的面積為0. 01cm2,高為0. 01cm,這樣它的體積為0. 0001cm3,即0.1mm3。由于1ml=1000mm3,所以每一大方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)×10 000=細(xì)胞數(shù)/ml,可按下式計(jì)算:細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml=4個(gè)大格細(xì)胞總數(shù)/4×10000。如計(jì)數(shù)前己稀釋,可再乘稀釋倍數(shù)。計(jì)數(shù)細(xì)胞后,可以根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果,以細(xì)胞數(shù)為縱坐標(biāo),以天數(shù)為橫坐標(biāo)繪制生長(zhǎng)曲線。
目前也有多家公司自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,如lifetechnology、Bio-rad等公司。自動(dòng)計(jì)數(shù)儀將圖像輸入電腦后自動(dòng)計(jì)數(shù),消除了手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的主觀性,消除了用戶之間的差異性,可以快速準(zhǔn)確地計(jì)數(shù)細(xì)胞,并同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞存活率及平均大小。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,有公司也推出了直接計(jì)數(shù)細(xì)胞的分析儀器,如Roche旗下Innovatis公司的CASY系列細(xì)胞計(jì)數(shù)分析系統(tǒng),CASY細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用*的電脈沖三維掃描分析技術(shù)。它突破了傳統(tǒng)二維細(xì)胞成像分析技術(shù)和染色法的局限,提供更加的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析功能。無(wú)需購(gòu)買染色劑,即可、快速地定量細(xì)胞濃度、體積、成團(tuán)和碎片。它根據(jù)測(cè)量的體積來計(jì)算細(xì)胞成團(tuán),即使是嚴(yán)重成團(tuán)的細(xì)胞,它也能正確定量。原代細(xì)胞死亡時(shí),細(xì)胞膜會(huì)破損,CASY測(cè)得的是細(xì)胞核的體積,根據(jù)體積大小的差別,我們可以區(qū)分活細(xì)胞、死細(xì)胞以及細(xì)胞碎片。
含量測(cè)定 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 木蘭脂素 20mg/支 英文名稱 110882-200605 規(guī)格:
含量測(cè)定 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 葫蘆巴堿 20mg/支 英文名稱 110883-200502 規(guī)格:
含量測(cè)定 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 大葉茜草素 20mg/支 英文名稱 110884-200604 規(guī)格:
含量測(cè)定 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 咖啡酸 20mg/支 英文名稱 110885-200102 規(guī)格:
含量測(cè)定 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 腺嘌呤 20mg/支 英文名稱 110886-200001 規(guī)格:
薄層鑒別 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 尿苷 20mg/支 英文名稱 110887-200202 規(guī)格:
含量測(cè)定 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 環(huán)維黃楊星 D 20mg/支 英文名稱 110888-200503 規(guī)格:
鑒別 含量: 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 蘇氨酸 20mg/支 英文名稱 110889-200102 規(guī)格:
原代細(xì)胞