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原代細(xì)胞培養(yǎng)有哪些經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)
閱讀:293 發(fā)布時(shí)間:2018-4-11原代細(xì)胞嚴(yán)格無(wú)菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干。
不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套。
有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)。
水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去)。
的是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用細(xì)胞房在養(yǎng)細(xì)胞。
別怕浪費(fèi)。槍頭什么的只要有可能污染就換,如果用酒精燈就什么都稍微烤一下,別直接放到火上,離一段距離。
動(dòng)作要既輕柔又有力。動(dòng)作太重會(huì)有一堆一堆的氣泡,動(dòng)作太輕就吹不下來(lái)。。。剛開始的時(shí)候吹細(xì)胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后來(lái)就是吹的時(shí)候槍里的培養(yǎng)基不要一次全都?jí)撼鰜?lái),留一點(diǎn),槍的zui頭部盡量深的在液面以下。
離開過操作臺(tái)的東西再進(jìn)操作臺(tái)之前一定要用酒精噴一遍,包括一切實(shí)驗(yàn)耗材、儀器、以及你帶著手套的手。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)的消毒。紫外什么的,用前用后都照個(gè)30分鐘。
身體的各個(gè)部分盡量的少接觸不需要接觸的地方的地方。比如實(shí)驗(yàn)臺(tái),又比如培養(yǎng)箱內(nèi)部。
細(xì)胞的密度根據(jù)細(xì)胞的性質(zhì)、傳代的時(shí)間以及自己的心情來(lái)定。培養(yǎng)基的話zui多zui多不要超過2天就要換一次。細(xì)胞可以不傳代,但是培養(yǎng)基是一定要換的。
不該碰的地方不碰,有影響的地方少碰;該使勁的時(shí)候不含糊,不該使勁的地方一定忍住。
凍存原代細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。
培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間*用酒精棉擦洗一次。
養(yǎng)細(xì)胞zui大的教訓(xùn):不能偷懶!
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