KGN使用說明書

KGN使用說明書操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 KGN使用說明書
種屬  人卵巢顆粒細胞瘤

提供形式  P4-5代T25細胞培養(yǎng)瓶

安全等級  2

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  90%低糖DMEM+10%FBS

生長條件  95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性  貼壁生長

存儲條件  50%低糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

詳細說明

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

KGN使用說明書注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。
正常大鼠腎細胞;NRK

人正常細胞;Hs 578Bst

SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解 (陽性對照) (變性)

EBTr細胞，牛胚氣管細胞 人結(jié)腸癌細胞,Ls-174-T細胞 CM-H077人心室肌細胞*培養(yǎng)基100mL

巨噬細胞培養(yǎng)基MaM

SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞

NT5E Others Rat 大鼠 CD73 / NT5E 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

A498細胞，人腎癌細胞系 蝙蝠肺細胞,Tb 1 Lu細胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2

EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2

hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類CD14+單核細胞，單一來源，預選型 10 million 人結(jié)膜成纖維細胞HConF

NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

大耳山羊肺細胞;LDG-1

前列腺上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

SF9細胞，昆蟲卵巢細胞 人卵巢癌細胞,Sw626細胞 人生發(fā)基質(zhì)細胞裂解物HHGMCL

非洲綠猴腎細胞;VERO-76

IGFBP4 Others Human 人 IGFBP4 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

大耳山羊肺細胞;LDG-1

IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

U2OS-Luc teT-on細胞，熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細胞 枯草芽孢桿菌 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1

CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 標簽)

LoVo(人大腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

L-脯安酸L-prolinepR10g

P2250-25GVitamin B5 維生素B5(D-泛酸鈣)137-08-625g81

ER1462BshTI (AgeI)1000 units2

G0399-5GGlutathione (Reduced) 谷胱甘肽(還原型)70-18-85g

DNase I, from bovine pancreas

氫氧化銨Ammonium xy7noxideAR500ml

SM1123FastRuler High Range DNA Ladder, ready-to-use177

T0234-500GTris xy7nochloride *基安基甲烷鹽酸鹽1185-53-1500g

3-(α-eetonylbenzyl)-4-xy7noxycoumarin, wo7ium salt25g

Palmitic acid25g

DL-a-甘油磷酸鈉(+4℃)  Sodium DL-α-glycerophosphate  進口  25g

DL-蘋果酸鈉  Sodium DL-malate  CP  25g

D-樟腦-10-磺酸  (+)-10-Camphorsulfonic acid  CP  25g

L-(+)-鈉  Sodium L-(+)-tartrate  AR  500g

KGN使用說明書博舒替尼  Bosutinib,SKI-606  380843-75-4  > 99%,(Src/Abl)酪氨酸激酶雙重抑制劑

神經(jīng)元生長因子    5mL    菌酮溶液 ,100mg/mL
腎系膜細胞生長因子    5mL    非變性蛋白分子量標準
生物素    1g    非變性法蛋白沉淀試劑盒
生物素標記 dUTP 溶液    50μL    非蛋白型 Western 封堵液
生物素標記的 Oligo(dT)    5μg    非凍型尿液 DNA 保存液
生物素化蛋博舒替尼  Bosutinib,SKI-606  380843-75-4  > 99%,(Src/Abl)酪氨酸激酶雙重抑制劑

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