詳細(xì)介紹
USMC使用說(shuō)明書(shū)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 USMC使用說(shuō)明書(shū)
種屬 大鼠平滑肌細(xì)胞
提供形式 P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%高糖DMEM+10%FBS
生長(zhǎng)條件 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
存儲(chǔ)條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
USMC使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO
EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
QSG-7701細(xì)胞,肝細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞 CM-R053大鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC
CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CL-0231TE-1(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MADB-106大鼠癌細(xì)胞 Breast cancer cells of MADB-106 rats 1640+10% FBS
IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 AAV-293( 胚腎細(xì)胞)
IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Interferon Gamma 人細(xì)胞裂解 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A
L1210瘤 淋巴白血病
HCC 94 [HCC941122]人鱗癌細(xì)胞(高分化) HCC 94 [HCC941122] in human uterine squamous cell carcinoma (high differentiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
小鼠腎臟上皮細(xì)胞(MREpiC)(5×105) KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A
人心肌細(xì)胞 (HCM) (1×106 )
CL-0003293A (人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2 小鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human
IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 人細(xì)胞裂解 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Anti-JNK3/MAPK10/FITC 熒光素標(biāo)記氨基末端激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Rabbit IgM 小鼠抗兔IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體 anti-G-CSF 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
FIZ1 英文名稱: 鋅指蛋白798抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Smad3(Ser208) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM 小鼠抗兔IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Anti-ALK/CD246Ag /FITC 熒光素標(biāo)記間變型淋巴瘤激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-FABP(brain)/FITC 熒光素標(biāo)記腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CPa(Clostridium perfringens alpha toxin) A型產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌) 規(guī)格 0.2ml
BK channel BK通道蛋白多肽 0.5mg
phospho-Kv2.1(Ser805) 英文名稱: 磷酸化鉀通道蛋白DRK1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Ube2G2/UBC7 泛素蛋白連接酶G2抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-FABP(brain)/FITC 熒光素標(biāo)記腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD14/Biotin 生物素化CD14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD5 CD5 多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22抗體 Anti-CD22/fpc1/blcam 0.1ml
SPARC 英文名稱: 富含半胱酸的酸性分泌蛋白抗體 0.1ml
ENPP7 英文名稱: 堿性鞘磷脂酶7抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 GSK3α(Phospho-Ser21) 規(guī)格 0.1ml
CD5 CD5 多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
USMC使用說(shuō)明書(shū)Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
phospho-FAK(Tyr577) 英文名稱: 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
外胚層發(fā)育不良抗體 Anti-ED-1 0.1ml
Anti-Phospho-Paxillin (Tyr118)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TCTP(Ser46) 磷酸化翻譯控制蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
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