HRGEC作用原理

HRGEC作用原理操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 HRGEC作用原理
種屬  人的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

提供形式  P1-2代凍存管

安全等級  2

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件  95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性  貼壁

存儲條件  50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

HRGEC作用原理注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1

人支氣管平滑肌細(xì)胞RNAHBSMC miRNA5 μg

LCK Others Human 人 Lck Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

WISH細(xì)胞，羊膜細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞,A-427細(xì)胞 rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞

CL-0444SNU-5(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CA14 Others Human 人 CA14 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T

MET Others Human 人 c-MET / HGFR (aa 956-1390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0364HuT 78(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 人絨癌細(xì)胞VP16耐藥株TNFa轉(zhuǎn)染，JEG-3/VP16-TNFa細(xì)胞 7F2(小鼠雜交瘤細(xì)胞)

人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427]

CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

ITK Others Mouse 小鼠 ITK Kinase (aa 351-619) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

CL-0193RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 人胚腎T細(xì)胞，293T細(xì)胞 P19(畸胎癌細(xì)胞)

人食管癌細(xì)胞;EC109

CD36 Others Human 人 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

ACVR1B Others Rat 大鼠 ACVR1B / ALK-4 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

胃黏膜上皮Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Jurkat細(xì)胞，急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞 正常小鼠Leydig細(xì)胞,TM4細(xì)胞 胰酶中和TNS

NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M116小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC

Anti-RXR Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記核受體RXRα抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

bovine Insulin protein 胰島素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg

一種細(xì)胞應(yīng)激分子抗體 Anti-MICA 0.1ml

SLC34A2 英文名稱： 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml

FOXO1A 英文名稱： 叉頭蛋白O1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PERK(Thr980) 磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

bovine Insulin protein 胰島素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg

Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人銜接蛋白酶活化因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml

BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 人膀胱抗原 96T

Nocturnin 英文名稱： 分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 0.2ml

BMX 英文名稱： 非受體性蛋白酪酸激酶ETK抗體 0.1ml

Anti-SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TPH /FITC 熒光素標(biāo)記色氨酸羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

色氨酸羥化酶抗體 Anti-TPH 0.2ml

SORCS1 英文名稱： 泡蛋白分選受體SORCS抗體 0.2ml

EMSY 英文名稱： EMSY蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體 規(guī)格 0.1ml

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

HRGEC作用原理Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser253) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml

兔抗D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體 anti-Clostridium perfringens type D 0.2ml

Anti-P27/kip1/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PIM3 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PIM3抗體 規(guī)格 0.2ml

human-HSA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記人血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

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