PK（15）作用原理

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資源名稱 PK（15）作用原理
種屬  豬腎細(xì)胞

形態(tài)  上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)

詳細(xì)說明

描述  該細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄病毒陽性，對(duì)豬霍亂，豬皰疹，口蹄疫，牛痘等敏感。

傳代情況  P134/136

支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）

使用權(quán)限  A類

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
PK（15）作用原理操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
PK（15）作用原理注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR

人肝臟星形細(xì)胞cDNAHHSteC cDNA

SMYD2 Others Human 人 SMYD2 / KMT3C 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

293細(xì)胞，轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞,GLC-82細(xì)胞 肺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

CL-0265CAL-27(人舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NTRK3 Others Human 人 TrkC / NTRK3 人細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MAPK1 Others Human 人 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHHSEC tRNA

T-24細(xì)胞，膀胱變移細(xì)胞癌 人肺鱗癌細(xì)胞,SK-MES-1細(xì)胞 UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌

家貓肺細(xì)胞;FCA-L1

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

肺成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63

豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1 EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞，B95-8細(xì)胞 MEL細(xì)胞，小鼠紅白血病細(xì)胞

人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

SIRPA Others Human 人 SIRPA / CD172A 人細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

肺成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

GPR114 Others Human 人 GPR114 人細(xì)胞裂解 (陽性對(duì)照) (變性)

大鼠破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

AZ-521人胃癌細(xì)胞 Human gastric cancer cells AZ-521 MEM+10% FBS

IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 空腸彎曲桿菌

Anti-PDE4D/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸二酯酶4D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-Dog IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體 Anti-Dnmt3a 0.1ml

Goat Anti-human IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗人IgG 0.3ml

FRG2B 英文名稱： FRG2B蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-TRADD(Ser269) 磷酸化壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Dog IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

CD117/c-kit/SCFR 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CCL6/C10 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHA4 原鈣粘附蛋白α4抗體 規(guī)格 0.2ml

C1S Kit Human 人 Complement C1s ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TBL1X 英文名稱： 轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖蛋白抗體 0.2ml

CD105 英文名稱： CD105抗體 0.1ml

Anti-CCL6/C10 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TLR3 /FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

BCHE(butyrylcholinesterase)NT 丁酰膽堿脂酶抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

組織因子途徑抑制劑-2抗體 Anti-TFPI-2 0.1ml

Phospho-Smad3 (Ser425) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml

Phospho-EGFR (Tyr998) 英文名稱： 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-LCK(Tyr394) 磷酸化淋巴細(xì)胞特異性蛋白酪氨酸激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

BCHE(butyrylcholinesterase)NT 丁酰膽堿脂酶抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

PK（15）作用原理Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

FAM96B 英文名稱： FAM96B蛋白抗體 0.2ml

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體 Anti-CEAcam8/CD67 0.2ml

Anti-mu Opioid receptor/FITC 熒光素標(biāo)記μ-型阿片受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PKN2 蛋白激酶N2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-monkey IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗猴IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml