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膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2022-03-22 21:30:08瀏覽次數(shù):251

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
貨號 YS-02X10042 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品:磷酸化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Anti-Cytochrome P450 2C9/CYP2C9 /FITC 熒光素標(biāo)記色素P450 2C9抗體IgG
嗜酸性粒過氧化物酶抗體Anti-Cytochrome P450 2D6/CYP2D6 /FITC 熒光素標(biāo)記色素P450 2D6抗體IgG
核酸內(nèi)切酶G抗體Anti-CK1/8/19(Cytokeratin

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱:膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10042

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性:

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

91.jpg 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

TLR1/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

細(xì)胞粘合素抗體  Tenascin/TN 0.1ml

Phospho-Smad2(Thr220) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 0.1ml

Phospho-Ezrin (Thr567) 英文名稱: 磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-LEO1(Ser551) 磷酸化RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 規(guī)格 0.1ml

Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

MAdCAM-1(Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

 phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉頭蛋白4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  human IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ 96T

SPOCK1 英文名稱: 蛋白聚糖1抗體 0.2ml

CHORDC1 英文名稱: 含半胱酸和組酸豐富域蛋白1抗體 0.2ml

 phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉頭蛋白4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rabbit  horse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

FGF14 英文名稱: 成纖維細(xì)胞生長因子14抗體 0.2ml

c-erbB-4癌基因抗體  C-erbB-4/HER4/erbB-4 0.1ml

 Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化μ-型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PKC-γ/SCA14 蛋白激酶C亞型G抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗小鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基BAD(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克人受體酪酶(RTKs)ELISA試劑盒,

BAX(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒,

BCL2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒,

Caspase 1 (抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克小鼠嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒,

Caspase-2-G(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒,

Caspase-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克大鼠β素(BTC)ELISA試劑盒,

Caspase-4 p20(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒,

Caspase 6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒,

Caspase-7(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒,

Caspase-8(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克賴 脫羧酶肉湯

Caspase-9(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克L-天門冬鉀

Caspase 10(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克BOC-L-脯

MYC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克L-甲狀腺素

TNF alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克二氫楊梅素 Dihydromyricetin

TNF beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克T4 DNA聚合酶

使用步驟:

一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

 


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