詳細介紹
產(chǎn)品名稱:糖原磷酸化酶b(GPb)試劑盒價格
規(guī)格 : 50管/24樣、50管/24樣
測試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號:YS-01S6668
測定意義
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
測定原理:
GP催化糖原和無機磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時測定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC 熒光素標記磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蛋白酪氨酸磷酸酶-1B/磷酸化酪氨酸抗體 Anti-PTP-1B/pTyr 0.1ml
Smad3 英文名稱: 細胞信號轉導分子SMAD3抗體 0.1ml
ENO1+ENO2+ENO3 英文名稱: 神經(jīng)元,肌肉特異性烯醇化酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MK6 (Ser207) 磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體 規(guī)格 0.1ml
HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
HGF human 人肝生素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh nonstructural protein 1/NS1 A型流感病毒-NS1抗體(神經(jīng)氨酸酶1) 規(guī)格 0.2ml
Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂堿性蛋白 96T
Triosephosphate isomerase 英文名稱: 磷酸丙糖異構酶抗體 0.2ml
phospho-CXCR2 (Ser347) 英文名稱: 磷酸化細胞表面趨化因子受體2抗體 0.2ml
Anti-Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Smad7 + Smad6 英文名稱: Smad7抗體 0.1ml
Estrogen receptor alpha 英文名稱: 雌受體α抗體 0.1ml
鈉碘轉運體蛋白抗體 Anti-NIS 0.1ml
Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) /FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p63 (Ser455) 磷酸化P63抑制基因抗體 規(guī)格 0.1ml
IKI3 family protein Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
糖原磷酸化酶b(GPb)試劑盒價格2-甲基(MeTHF)(Standard for GC,≥99.5%(GC))賴諾普利0.2摩爾基質金屬蛋白酶2/9抑制劑卡托普利(captopril)
異戊烷(Standard for GC,≥99.7%(GC))富馬酸喹硫平 基質金屬蛋白酶1抑制劑
烯酸甲酯(MA)(Standard for GC,>99%(GC))氨磷汀尿酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒
丁酸甲酯(Standard for GC,>99.5%(GC))曲昔匹特組織尿酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒
α-甲基烯酸(Standard for GC)鹽酸萘替芬血液尿酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒
乙二甲(standard for GC,>99.7%(GC))碳酸鈣體液尿酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒
N-甲基吡咯烷酮(NMP)(standard for GC,≥99.6%(GC))甲磺酸氨氯地平尿酶(UROKINASE)活性比色法定量檢測試劑盒
異丁(standard for GC,≥99.5%(GC))伏格列波糖組織尿酶(UROKINASE)活性比色法定量檢測試劑盒