DR4 MEF使用原理

DR4 MEF使用原理操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 DR4 MEF使用原理
種屬  DR4小鼠胚胎成纖維細(xì)胞，經(jīng)射線處理，P3,300萬細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）

類型  取孕12.5天的DR4小鼠的胚胎制備后經(jīng)過射線處理

形態(tài)  成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  MEF細(xì)胞*培養(yǎng)基（100 ml）： DMEM (Invitrogen, 12430) 88 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml Glutamax (Invitrogen, 35050) 1 ml Non-essential Amino Acids, 100× (Invitrogen, 11140) 1 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

詳細(xì)說明

動物種別  小鼠，DR4轉(zhuǎn)基因小鼠

描述  經(jīng)射線處理的P3代飼養(yǎng)層細(xì)胞，每支細(xì)胞量3×106，具有四種抗性。經(jīng)測試可以耐受藥物濃度如下：G418 (neomycin): 200 μg/ml; Puromycin: 0.4 μg/ml; Hygromycin: 110 μg/ml; 6-Thioguanine: 2.5 μg/ml。

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

DR4 MEF使用原理注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人牙齦成纖維細(xì)胞cDNAHGF cDNA

豬胚胎傳代細(xì)胞;ST 頸癌細(xì)胞，SiHa細(xì)胞 B22細(xì)胞，KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

人牙齦成纖維細(xì)胞cDNAHGF cDNA

豬胚胎傳代細(xì)胞;ST 頸癌細(xì)胞，SiHa細(xì)胞 B22細(xì)胞，KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 細(xì)胞，C127細(xì)胞 J774A.1細(xì)胞，鼠腹水單核細(xì)胞瘤

人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4

人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

人小腦顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

大鼠三葉因子2(TFF2)ELISA試劑盒 ，英文名： TFF2 ELISA Kit

Mouse signal transduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒

Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHAase(HumanHyaluronidase)ELISAKit人透明質(zhì)酸酶規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒20次

RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒MouseVitaminC,VCELISAKit 96T/48T

人抗麥膠蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒 Human anti-gliadin antibody IgG ELISA Kit

RabbitInterleukin1,IL-1ELISAKit兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞TNFBETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒10/50次

Humantumournecrosisfactorrelatedweakinducerofapoptosis,TWEAKELISA試劑盒人壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人雄激素受體(AR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

豬前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫試劑盒 Pig prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit

HumanEndostatin,ESELISAKit 人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanMatrixmetalloproteinase13,MMP-13ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織樣品組織蛋白酶G(CATHEPSING)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanheartfattyacidbindingprotein，h-FABPELISAKit人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DR4 MEF使用原理人血漿抗凝蛋白Celisa試劑盒   人血漿抗凝蛋白C試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人血漿抗凝蛋白C試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人血漿抗凝蛋白C試劑盒、人血漿抗凝蛋白C elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人血漿α顆粒膜蛋白elisa試劑盒   人血漿α顆粒膜蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人血漿α顆粒膜蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人血漿α顆粒膜蛋白試劑盒、人血漿α顆粒膜蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人血紅素氧化酶1elisa試劑盒   人血紅素氧化酶1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人血紅素氧化酶1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人血紅素氧化酶1試劑盒、人血紅素氧化酶1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人血紅素氧合酶2elisa試劑盒   人血紅素氧合酶2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人血紅素氧合酶2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人血紅素氧合酶2試劑盒、人血紅素氧合酶2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

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