詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產品名稱:胃癌細胞;MKN45
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9797
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
PSD-95/FITC 熒光素標記突觸后密度蛋白95抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Donkey human IgG Whole serum 驢抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
胰島素1-51蛋白抗體 Insulin 0.1ml
Mouse Bovine IgG ascites 小鼠抗IgG腹水 1ml
Fibulin 2 英文名稱: 纖連蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PRKCZ(Thr500) 磷酸化蛋白激酶C(T500)抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey human IgG Whole serum 驢抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CAP2 環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDE4A8 磷酸二酯酶4A8抗體 規(guī)格 0.2ml
HA Kit Influenza 甲型流感 H1N1 (豬流感 2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體 ELISA
THYN1 英文名稱: 胸腺細胞核蛋白1抗體 0.1ml
phospho-c-Jun(Ser63) 英文名稱: 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
CAP2 環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit chicken IgM 兔抗雞IgM 0.2ml
FMR1 英文名稱: 脆性X綜合征相關蛋白AFF1抗體 0.2ml
艾滋病病毒-1/人類缺陷病毒1型抗體 HIV-1 0.1ml
Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC 熒光素標記磷酸化腺衍生血管內皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RGS19(Ser24) 磷酸化G蛋白信號轉導調節(jié)因子19抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse IgM 小鼠IgM (親和純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
胃癌細胞;MKN45兒茶素沒食子酯酸水晶蘭苷通用型環(huán)斑?。?/span>Tobacco Ringspot Virus;TRSV)基因檢測試劑盒
氯化鎂銨,氯化銨鎂,六水合氯化鎂銨水楊苷通用型番茄斑萎?。═omato Spotted Wilt Virus;TSWV)基因檢測試劑盒
3-(4-溴基)-5-甲基-1H-吡唑斯皮諾素通用型總番茄斑萎?。═otal Tospo Virus;TOSPO)基因檢測試劑盒
訶子林鞣酸松果菊苷通用型南瓜黃化花葉?。?/span>Zucchini Yellow Mosaic Virus;ZYMV)基因檢測試劑盒
訶子鞣質,訶子鞣酸松蘿酸通用型瓜類性果斑?。ㄎ鞴瞎撸ˋcidovorax avenae subsp. citrulli;Watermelon Fruit Blotch)基因檢測試劑盒
劍麻皂苷元(標準品)松脂二葡萄糖苷通用型胡蘿卜性葉斑?。╔anthomonas campestris pv. Carotae;Xccar)基因檢測試劑盒
蟛蜞菊內脂;蟛蜞菊內酯(標準品)酸棗仁皂苷A通用型野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris pv. Pelargonii;Xcp)基因檢測試劑盒
1,5-異喹啉二,1,5-二羥基異喹啉酸棗仁皂苷B通用型加拿大低酸菜籽油黑脛病/油菜腐爛病/甘藍黑莖病菌(Blackleg of Canola/Leptosphaeria maculans/Phoma lingam)基因檢測試劑盒