產(chǎn)品名稱:磷脂酶C(PLC)測試盒規(guī)格
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測試方法:微量法、可見分光光度法
貨號(hào):YS-01S6486
測定意義
磷脂酶C(EC 3.1.4.3)是一種水解甘油磷酸酯C3位點(diǎn)甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶,廣泛存在于微生物及動(dòng)植物的組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞代謝、細(xì)胞傳遞、生長發(fā)育等方面具有重要作用。
測定原理
磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚,在410nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
Anti-Syntaxin 1/Syn1A /FITC 熒光素標(biāo)記突觸融合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Rad51抗體 Anti-Rad51 0.2ml
phospho-STAT1 (Ser727) 英文名稱: 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 0.1ml
ENPP2 英文名稱: 核苷酸焦磷酸酶2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MK5(Ser311+Thr315) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶5抗體 規(guī)格 0.1ml
ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
GRO human 人生長相關(guān)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Collagen I Ⅰ型膠原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型) 規(guī)格 0.1ml
Human desmin,Des ELISA Kit 人結(jié)蛋白 96T
TROP2 英文名稱: 細(xì)胞表面糖蛋白Trop2抗體(胰腺癌標(biāo)志物蛋白) 0.1ml
CEPT1 英文名稱: 膽堿/乙醇胺磷酸轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
Anti-Collagen I Ⅰ型膠原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Synapsin II 英文名稱: 神經(jīng)突觸素2抗體 0.2ml
ESYT1 英文名稱: 延伸突觸蛋白1抗體 0.2ml
軸索過度生長抑制因子-B抗體 Anti-Nogo-B 0.2ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Thr18) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
Bax peptide Bax(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
磷脂酶C(PLC)測試盒規(guī)格氘代鹽酸(50g)大車前苷活體半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代鹽酸(50g)8-O-乙酰山梔苷甲酯凍切片半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代甲(5g)水晶蘭苷活體半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代甲(0.50 mL x 10 )黃杞苷凍切片半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代甲(0.5 mL x 10 )巴豆苷活體半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代甲(0.6ml x 10)沙苑子苷A凍切片半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代甲(0.6ml x 10)穗花杉雙黃酮活體半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位熒光染色檢測試劑盒
氘代甲(10g )土荊皮乙酸凍切片半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位熒光染色檢測試劑盒