詳細介紹
產(chǎn)品名稱:破骨細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10082
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
V.cholera Ogawa/Biotin 生物素化01群稻葉型霍亂弧菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Multi-class antibodies規(guī)格: 1g
多配體蛋白聚糖1抗體 CD138/Syndecan-1 0.1ml
PI14 英文名稱: 蛋白酶抑制劑14抗體 0.2ml
EFS 英文名稱: 對接蛋白EFS抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙?;?/5/7抗體 規(guī)格 0.1ml
Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Multi-class antibodies規(guī)格: 1g
UPAR 小鼠凝血酶受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
FasL 兔抗FasL抗體。Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit 人肌細胞生成素 96T
SOCS7 英文名稱: 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子7抗體 0.1ml
phospho-CTBP1 (Ser422) 英文名稱: 磷酸化C端結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
FasL 兔抗FasL抗體。Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Goat Mouse IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
Filaggrin 英文名稱: 兜甲蛋白抗體 0.1ml
白細胞粘附蛋白抗體 CD18/LFA-1 0.2ml
NR2C/NMDAR2C /FITC 熒光素標記谷受體2C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLSCR3 磷脂爬行酶3抗體 規(guī)格 0.2ml
CD167a(DDR1)/HRP 辣根過氧化物酶標記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
破骨細胞*培養(yǎng)基超氧化物歧化酶(SOD)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒(含標準樣)50次羧甲基纖維素
超氧化物歧化酶(SOD)標準曲線測定試劑盒5次微量可調(diào)移液器P50
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒50次3-羥基
超氧化物歧化酶(SOD)細胞裂解樣品制備試劑盒?50次2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二羧酸鈉
超氧化物歧化酶(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒?50次人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒,
超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒?50次人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒,
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒?50次人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒,ITF ELISA kit
胞漿超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分離試劑盒50次人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒,AFP-L1 ELIS
線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒50次人單核增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒,
超氧化物歧化酶(SOD)活性終點比色法定量檢測試劑盒50/100次人磷酸化蛋白酶C(P-PKC)ELISA試劑盒,
細胞谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次人鏈酶(SK)ELISA試劑盒,
組織谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒,
血液谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)總活酶動力性比色法定量檢測試劑盒20次人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒,
微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒,
胞漿谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次小鼠雌素(E)ELISA試劑盒,
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。