酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)真核蛋白

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)真核蛋白公司正在出售的產(chǎn)品：牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）核suan檢測試劑盒（RT-PCR）牛病毒性腹瀉病毒PCR檢測試劑盒牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測試劑盒Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)RTPCR牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測試劑盒Bovine Viral Diarrhea Virus 2 (BVDV2)2RTPCR牛病毒性腹瀉病毒

公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)真核蛋白   

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Eukaryotic Acid Sphingomyelinase (ASM)

SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

相關(guān)產(chǎn)品：
磷脂酸磷酸酶2C(PPAP2C)重組蛋白Recombinant Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)

磷脂酸磷酸酶2B(PPAP2B)重組蛋白Recombinant Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2)

磷脂爬行酶5(PLSCR5)重組蛋白Recombinant Malate Dehydrogenase 1 (MDH1)

磷脂爬行酶4(PLSCR4)重組蛋白Recombinant Leucyl/Cystinyl Aminopeptidase (LNPEP)

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后，表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點：

標記：標記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法。

酶標記：酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標記：熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

AADACL2產(chǎn)品名稱: 芳香乙酰胺脫乙酰基mei樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit, Sheep

Hemogen產(chǎn)品名稱: 紅細胞分化相關(guān)基因蛋白抗體交叉反應(yīng): Human

Pectinesterase inhibitor 18產(chǎn)品名稱: 果膠mei蛋白18抗體交叉反應(yīng): Arabidopsis Thaliana

CTDSPL產(chǎn)品名稱: 聯(lián)會復(fù)合體蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit

SLC30A9產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體家族蛋白30成員A9抗體交叉反應(yīng): Human, Rat

Inhibin Alpha產(chǎn)品名稱: suA/Inhibin α抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Monkey

heavy chain cardiac Myosin產(chǎn)品名稱: 心肌肌球蛋白重鏈抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

KAT13D/CLOCK產(chǎn)品名稱: 生物鐘KAT13D蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

RRAGA + RRAGB產(chǎn)品名稱: RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep

INCENP產(chǎn)品名稱: 內(nèi)著絲粒蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)真核蛋白大鼠煙堿型乙酰受體(N-AChR)ELISA試劑盒N-AChR煙堿型乙酰受體ELISA試劑盒Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit

大鼠牙本質(zhì)磷蛋白(DPP)ELISA試劑盒DPP牙本質(zhì)磷蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat dentin phosphoproteins,DPP ELISA kit

大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)ELISA試劑盒GPIIb血小板膜糖蛋白IIbelisa檢測試劑盒Rat Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit

大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)ELISA試劑盒GPIb血小板膜糖蛋白Ibelisa kitRat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit

大鼠血清su受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)ELISA試劑盒5-HT-2A血清su受體2A/5-羥色胺受體2Aelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxytryptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit