3D10使用原理

3D10使用原理冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→（-20℃30分鐘*）→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低

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資源名稱 3D10使用原理
種屬  小鼠7

形態(tài)  淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

生長特性  半貼壁生長

詳細(xì)說明

描述  可產(chǎn)生單克隆抗體。

傳代情況  C25

支原體檢測  陰性

使用權(quán)限  A類冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
3D10使用原理操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
3D10使用原理注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr

RGMA Others Human 人 RGMA 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

A375 人惡性色素瘤細(xì)胞

C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-EGFP-puro (lentiviral construct stable strain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml puromycin

RSPO2 Protein Human 重組人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 標(biāo)簽)

人氣管平滑肌細(xì)胞 (HTSMC)( 5×105 ) MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Mouse

CD3D Others Human 人 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB

C57BL/6小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice

SW1353細(xì)胞，人骨肉瘤細(xì)胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38

SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB

CD3D Others Human 人 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

C57BL/6小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice

SW1353細(xì)胞，人骨肉瘤細(xì)胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38

SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0389NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1 大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞，A10細(xì)胞 BNL1ME A.7R.1細(xì)胞，BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞

人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2

人無色素睫狀上皮細(xì)胞總RNAHNPCEpiC tRNA

Anti-USP1/FITC 熒光素標(biāo)記泛素特異性蛋白酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CD2AP (CD2-associated protein) 白細(xì)胞分化抗原CD2APMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗體 Anti-CCR-2A 0.1ml

SAMD14 英文名稱： SAMD14抗體 0.2ml

ENPP1 英文名稱： 核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HER3 (Tyr1222) 磷酸化HER3受體抗體規(guī)格 0.1ml

CD2AP (CD2-associated protein) 白細(xì)胞分化抗原CD2APMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

EPOR ELISA Kit 大鼠紅細(xì)胞生成素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-APS(Ser598)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化APS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM3B/PANDER 胰腺衍生因子抗體 規(guī)格 0.2ml

ALP ELISA Kit 大鼠堿性磷酸酶 96T

Phospho-MAP3K8 (Thr290) 英文名稱： 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml

Annexin A10 英文名稱： 膜粘連蛋白10抗體 0.1ml

Anti-APS(Ser598)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化APS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PAI-2/FITC 熒光素標(biāo)記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 1ml

周期素H抗體 Anti-Cyclin H 0.2ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

FAR1 英文名稱： 脂肪?；o酶A還原酶1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-VASP(Ser157) 磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 1ml

3D10使用原理SSEA4 英文名稱： 階段特異性胚胎表面抗原4抗體 0.1ml

Ep300 英文名稱： CREB結(jié)合蛋白p300抗體 0.1ml

早老素蛋白-1抗體 Anti-PS-1 0.2ml

Anti-Synapsin I /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)突觸素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 規(guī)格 0.1ml

HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg