成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基

成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：磷酸化表皮生長因子受體抗體Anti-EGF/FITC 熒光素標(biāo)記表皮生長因子抗體(大鼠)IgG
磷酸化埃茲蛋白抗體Anti-EP3/FITC 熒光素標(biāo)記前列腺素E受體3抗體IgG
磷酸化埃茲蛋白抗體Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希桿菌O6抗體IgG
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體A

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10084

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

phospho-SHC (Tyr427) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

AR (Androgen Receptor)peptide 雄受體(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗體  NF-κBp50 0.1ml

5-HTR2B 英文名稱： 5-羥色胺受體2B抗體 0.1ml

Ezrin 英文名稱： 埃茲蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷酸化絲/蘇激酶p90RSK蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

AR (Androgen Receptor)peptide 雄受體(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

NE(Humen) 大鼠去甲腎上腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 eIF4E 真核翻譯起始因子4E抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mycobacterium bovis 結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

HSPG(Human heparin sulphate protoglycans) ELISA Kit 人肝素糖蛋白 96T

SOAT2 英文名稱： 膽固醇?；D(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml

Calneuron 1 英文名稱： 鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體 0.2ml

 eIF4E 真核翻譯起始因子4E抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FARP2 英文名稱： 鳥嘌呤核苷酸交換因子FARP2抗體 0.2ml

CD169抗體  CD169/Siglec-1/sialoadhesin 0.1ml

 Phospho-NMDAR2B (Tyr1070) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化谷受體2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Plzf 早幼粒細(xì)胞白血病鋅指蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

 CEA/Biotin 生物素化鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基乳酸脫氫酶（LDH）總活性終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒20次人抗突變型瓜波形蛋白抗體（MCV）ELISA試劑盒, MCV ELISA kit

細(xì)胞肌酸酶（CK）活性酶動(dòng)力比色法定量檢測試劑盒25次人抗髓磷脂抗體IgA（AMA IgA）ELISA試劑盒, AMA IgA ELISA kit

組織肌酸酶（CK）活性酶動(dòng)力比色法定量檢測試劑盒25次人蛋白酶3抗體（PR3Ab）ELISA試劑盒,PR3Ab ELISA

體液肌酸酶（CK）活性酶動(dòng)力比色法定量檢測試劑盒25次人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG（LF/LTF Ab-Ig）ELISA試劑盒,LF/LTF Ab

肌酸酶（CK）活性終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒20次人胰抑制素（Pancreastatin）ELISA試劑盒, Pancreastatin ELISA

細(xì)胞丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒50次人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒,EPI ELISA

組織丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒50次人鈣腔蛋白（CALU）ELISA試劑盒,CALU ELISA

血液丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒50次人解整合素樣金屬蛋白酶10（ADAM10）ELISA試劑盒,

高干擾血清/血漿丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒50次人肽釋放酶6（KLK 6）ELISA試劑盒,

體液丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒50次人肌酸酶同工酶MB（CK-MB）ELISA試劑盒,

植物丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒50次人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA試劑盒,

丙二醛（MDA）終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒50次小鼠血栓前體蛋白（TpP）ELISA試劑盒,

細(xì)胞總抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量檢測試劑盒50次豚鼠生長素（GH）ELISA試劑盒,

組織總抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量檢測試劑盒50次豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP）ELISA試劑盒,

食物總抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量檢測試劑盒50次兔補(bǔ)體蛋白3（C3）ELISA試劑盒,