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詳細(xì)介紹
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！
產(chǎn)品名稱：中性轉(zhuǎn)化酶（NI）測試盒品牌
規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣
測試方法:微量法、可見分光光度法
貨號：YS-01S6521
測定意義
蔗糖轉(zhuǎn)化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH，將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）兩種類型。
NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。
測定原理：
NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計(jì)算NI活性
自備用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
HA tag HA tag標(biāo)簽多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
TFRC Transferrin Receptor / TFRC / CD71 兔單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser339) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗親和素純化抗體 1mg/10mg 國產(chǎn)
YES1 英文名稱： 原癌基因酪酸蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml
DRD4 英文名稱： 多巴胺受體D4抗體 0.2ml
TFRC Transferrin Receptor / TFRC / CD71 兔單抗 (PE) Human
Measles virus of fusion protein 麻疹病毒抗原(麻疹病毒融合蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CD48 CD48 / SLAMF2 兔單抗 (APC) Mouse
Rhesus antibody Rh phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2612) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
定性濾紙(60cm×60cm) 1張 國產(chǎn)
ZDHHC16 英文名稱： 細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體 0.2ml
DGAT2 英文名稱： 甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.1ml
CD48 CD48 / SLAMF2 兔單抗 (APC) Mouse
phospho-14-3-3 Tau (Ser232) 英文名稱： 磷酸化14-3-3 τ抗體 0.1ml
Phospho-EEF2k (Ser359) 英文名稱： 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 0.1ml
雄結(jié)合蛋白抗體 Anti-ABP 0.1ml
Anti-WNK3 protein/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Filamin A/FLNA (Ser2522) 磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 規(guī)格 0.1ml
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
中性轉(zhuǎn)化酶（NI）測試盒品牌稻瘟靈（標(biāo)準(zhǔn)品）百 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號：141-66-2 100MG離子（K）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
咪唑乙煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）地昔尼爾 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號：112636-83-6 100MG酵母離子（K）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
異?。?biāo)準(zhǔn)品） 苯甲環(huán)唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號： 0.25g通用型鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
甲咪唑煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品） 野燕枯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號：43222-48-6 1000mg鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
水硫磷（標(biāo)準(zhǔn)品） 二氟沙星 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號： 0.1g組織鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
亞硫磷（標(biāo)準(zhǔn)品） 除蟲脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號：35367-38-5 1000mg血液鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
異標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=6%） 吡氟酰草 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號：35367-38-5 250mg體液鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
抑霉唑（標(biāo)準(zhǔn)品） 二氟吡隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號：109293-98-3 100mg環(huán)境鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
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