丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒規(guī)格 返回列表頁(yè)

產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒規(guī)格

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6474

測(cè)定意義

PDC主要存在于酵母中，是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一，催化丙酮酸脫羧生成乙醛。

測(cè)定原理：

PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛，添加乙醇脫氫酶（ADH）來(lái)進(jìn)一步催化 NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340 nm有吸收峰，而NAD+沒有；通過(guò)測(cè)定340 nm光吸收下降速率，來(lái)計(jì)算PDC活性。

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

STAT6 STAT6 鼠單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser462) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

兔抗FITC純化抗體 1mg 國(guó)產(chǎn)

phospho-YES1(Tyr537) 英文名稱： 磷酸化原癌基因酪酸蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml

DDX5 英文名稱： 三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體 0.2ml

STAT6 STAT6 鼠單抗 (PE) Human

Endostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Tyr992) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

F10培養(yǎng)液(Ham) 250ml 國(guó)產(chǎn)

ZBT10 英文名稱： 鋅指蛋白ZBT10抗體 0.2ml

beta Defensin 1 英文名稱： 防御素β1/Defensin β1抗體 0.1ml

氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 0.1ml

SARM1 英文名稱： SARM1蛋白抗體 0.2ml

EphB1+EphB2 英文名稱： 蛋白激酶受體B1+B2抗體 0.2ml

丙氨酰tRNA合成酶2抗體 Anti-AARS2 0.1ml

Anti-Wnt2B/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO3a (Ser294) 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 規(guī)格 0.1ml

CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒規(guī)格正磷酸鐵(>98%,BR)異鼠李素-3-O-新橙皮苷 蛋白共沉淀分析試劑盒-LEPTIN

還原鐵粉(>98%,BC)紫蓳靈 /組織裂解懸液、血液、體液等蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒-LEPTIN

1-溴代異戊烷(>98%,BR)高麗槐素 FITC綠色熒光標(biāo)記一抗

異佛爾酮(>98%,BR)秦皮苷TRITC紅色熒光光標(biāo)記一抗

異(>98%,BR)奇任HRP標(biāo)記一抗

異香草(>98%,BR)高良姜素通用載玻片制備試劑盒

異香草(標(biāo)準(zhǔn)品)比枯枯靈熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒（無(wú)一抗和二抗）

衣康酸(>98%,BR)異槲皮苷熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒（含熒光二抗）