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詳細介紹
產(chǎn)品名稱：雙縮脲法蛋白含量測試盒說明書
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測試方法:微量法、可見分光光度法
貨號：YS-01S6675
測定意義
強堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物；紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質(zhì)，適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品，尤其是動物材料。
試劑組成和配置
1、雙縮脲試劑×1瓶，4℃保存；
2、10mg/ml標準蛋白×1支，-20℃保存；
3、標準蛋白配制：取10mg/ml標準蛋白100μl加雙蒸水100μl，即得5mg/ml標準蛋白溶液。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根過氧化物酶標記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
肝細胞生長因子受體抗體 Anti-C-Met/HGFR 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgG 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PILR beta 細胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根過氧化物酶標記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HPV18 E6 人類狀瘤病毒18抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ABCB6 ATP結合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
WNT7A 英文名稱： 原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml
Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名稱： 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml
Anti-ABCB6 ATP結合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
phospho-SHC (Tyr427) 英文名稱： 磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體 0.1ml
EBNA 3B 英文名稱： EB病毒核抗原-3B抗體 0.2ml
CD40L抗體 Anti-CD40L 0.1ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格 0.1ml
Cdc34 peptide 細胞周期調(diào)控因子34抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
雙縮脲法蛋白含量測試盒說明書二甲氯(標準品)羅格列酮組織AURORA-A酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
油酸甲酯(分析標準品,>99.0%(GC))草酸艾司西酞普蘭AURORA-B酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
烯酸甲酯（MA）(分析標準品,≥99.5%(GC))依西美坦組織AURORA-B酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
丁酸甲酯(分析標準品,≥99.5%(GC),用于環(huán)境分析)依西美坦中間體（雄烯二酮）AURORA-C酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
3-甲基膽蒽標準溶液(100 ng/μL ,基體：乙)鹽酸曲美他組織AURORA-C酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
異丁(分析標準品,≥99.8%(GC))孟魯司特鈉ERK1/2酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
乙酸甲酯(分析標準品,99.9%（GC))S-孟魯司特鈉組織ERK1/2酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
二乙二二甲(分析標準品,≥99.7%(GC))鹽酸氨酮戊酸P38a酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
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