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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phosphofructokinase, Liver (PFKL) |
| 種屬 | Rattus norvegicus (Rat，大鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)重組蛋白 | Recombinant Phosphofructokinase, Liver (PFKL) | Rattus norvegicus (Rat，大鼠) |
商品介紹：
PFK-B; 6-phosphofructokinase type B; Phosphofructo-1-kinase isozyme B; Phosphohexokinase 酶與激酶 物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 來源：原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：細胞質(zhì) 預(yù)測分子量：45.7kDa 實際分子量：43kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽：Ala2~His390 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 95% 等電點：6.0 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human SH2D1B宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human ACSL1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human CHEK2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human PRC1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Cytokeratin 19產(chǎn)品名稱: 細胞角蛋白19單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
CXCL16產(chǎn)品名稱: CXC趨化因子16抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
phospho-AMPK alpha 1 (Ser356)產(chǎn)品名稱: 苷單磷suan活化蛋白激meiα1/AMPK α 1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
RBPJK產(chǎn)品名稱: tch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白RBPJK抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
phospho-SCNN1B (Thr615)產(chǎn)品名稱: 上皮鈉通道β2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
Histone H3 (acetyl K9)產(chǎn)品名稱: 乙?；M蛋白H3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Fruit Fly
應(yīng)用類型: Other英文名稱: HLA-DQA1英文別名: CD; CELIAC1; DC 1 alpha chain; DC alpha; DC-1 alpha chain; DC-alpha; DC1, included; DQ alpha 1 chain; DQ-A1; DQ-DRW9 alpha chain; DQA1_HUMAN; FLJ27088; FLJ27328; Gluten-sensitive enteropathy (celiac disease); GSE; HLA class II histocompatibility antigen; HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 1 chain; HLA class II histocompatibility antigen, DQ(W3) alpha chain; HLA-DCA; HLA-DQA; HLA-DQA1; HLA-DQA1 major histocompatibility complex, class II, DQ alpha 1; HLADC histocompatibility type; Immune response antigens HIa, included; leucocyte antigen DQA1; leukocyte antigen alpha chain; Major
Phospho-Beta Catenin (Ser675)產(chǎn)品名稱: β 連環(huán)su蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CT054產(chǎn)品名稱: 核黃su轉(zhuǎn)運蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
IL6ST/CD130產(chǎn)品名稱: 白細胞介su6受體β/CD130抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)重組蛋白人整合su關(guān)聯(lián)蛋白(IAP)ELISA試劑盒IAP整合su關(guān)聯(lián)蛋白elisa檢測試劑盒Human Integrin Associated Protein(IAP)ELISA Kit
人整合suβ8(ITGβ8)ELISA試劑盒ITGβ8整合suβ8elisa kitHuman Integrin Beta 8(ITGb8)ELISA Kit
人整合suβ7(ITGβ7)ELISA試劑盒ITGβ7整合suβ7ELISA試劑盒Human Integrin Beta 7(ITGb7)ELISA Kit
人整合suβ6(ITGβ6)ELISA試劑盒ITGβ6整合suβ6elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Integrin Beta 6(ITGb6)ELISA Kit
人整合suβ5(ITGβ5)ELISA試劑盒ITGβ5整合suβ5elisa檢測試劑盒Human Integrin Beta 5(ITGb5)ELISA Kit
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