大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：FAHD1蛋白抗體Anti-HDAC11/FITC 熒光素標記組蛋白去乙?；?1抗體IgG
磷酸化粘著斑酶抗體Anti-HDAC12/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶12抗體IgG
磷酸化粘著斑酶抗體Anti-CD36L1/SRB1 /FITC 熒光素標記高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體IgG
下頜發(fā)育綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體Anti

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10172

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

NIS/FITC 熒光素標記鈉碘轉(zhuǎn)運體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 WIG-1/FITC 熒光素標記野生型p53誘導(dǎo)基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

β-乳球蛋白抗體  bov β-lactoglobulin 1.0ml

Goat  human IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗人IgG 0.1ml

G protein alpha 13 英文名稱： G蛋白結(jié)合蛋白α13/Gα13抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPM2C 蛋白磷酸酶2C抗體 規(guī)格 0.2ml

 WIG-1/FITC 熒光素標記野生型p53誘導(dǎo)基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PCNA 小鼠增殖細胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 FGF1/AFGF 酸性成纖維細胞生長因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  rat IgG 小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 1mg

Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 人他克莫司 96T

SH3KBP1 英文名稱： SH3結(jié)構(gòu)域激酶結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml

C9orf153 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框153抗體 0.2ml

 FGF1/AFGF 酸性成纖維細胞生長因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgM 0.1ml

GPR155 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體 0.2ml

芳香化酶/細胞色素P450/P450抗體  Aromatase P450 0.1ml

 NFAM1/CNAIP/FITC 熒光素標記NFAM1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRKAA2/AMPK alpha 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 規(guī)格 0.1ml

 Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 熒光素標記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基組織PKA酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次甲酰三氟丙酮

細胞Src酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次仲辛醇

組織Src酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次安息香

細胞PKC酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次酞

組織PKC酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次甲基正壬酮

細胞AMPK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次脫水穿心蓮內(nèi)酯

組織AMPK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次香附

細胞B-RAF酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次厚樸

組織B-RAF酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次隔山消

細胞C-TAK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次大果木姜子

組織C-TAK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次艾葉

細胞CaM KII酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次盾葉薯蕷

組織CaM KII酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次巴龍霉素

細胞CaM KIV酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次氟尿嘧啶

組織CaM KIV酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次雙