化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
細胞特性：
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：肝動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10017
細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常
儲存條件：2℃-8℃，避光儲存
運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細胞處理：
1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟：
一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。
RXR Alpha/FITC 熒光素標記核受體RXRα抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
bovine Insulin protein 胰島素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
一種細胞應(yīng)激分子抗體 MICA 0.1ml
SLC34A2 英文名稱： 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗體 0.1ml
FOXO1A 英文名稱： 叉頭蛋白O1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PERK(Thr980) 磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
bovine Insulin protein 胰島素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
NKB(Human Neurokinins B) ELISA Kit 人神經(jīng)激肽BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
HAI-1 肝細胞生長因子激活物抑制劑抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit 人中性粒細胞彈性蛋白酶 96T
STAT4 英文名稱： 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 0.1ml
CD97 antigen subunit alpha 英文名稱： 白細胞抗原CD97 alpha 抗體 0.1ml
HAI-1 肝細胞生長因子激活物抑制劑抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse Rabbit IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 (phospho T24 + T32) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白家族抗體 0.1ml
致癌基因抗體 C-Myc/MYC/MTLC 0.1ml
P-p38 ERK/MAPK14 /FITC 熒光素標記磷酸化-原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PILR beta 細胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse human IgG Monoclonal Antibody/HRP 辣根過氧化物酶標記小鼠抗人IgG單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
肝動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基/酵母細胞細胞壁分離試劑盒20次人β萘酚（β-Nph）ELISA試劑盒,
細胞可溶性總核蛋白制備試劑盒20次小鼠FMS樣酪酶3配體（Flt3L）ELISA試劑盒,
組織可溶性總核蛋白制備試劑盒20次人可溶性白抗原G（sHLA-G）ELISA試劑盒,
細胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次人血小板因子3（PF-3）ELISA試劑盒,
線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次人甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）ELISA試劑盒,
高純胞漿S100蛋白制備試劑盒20次人高靈敏度促甲狀腺素（U-TSH）ELISA試劑盒,
細胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯（AcSDKP）ELISA試劑盒,
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次小鼠白血病抑制因子（LIF）ELISA試劑盒,
植物組織可溶性總蛋白粗提制備試劑盒20次小鼠β萘酚（β-Nph）ELISA試劑盒,
植物組織可溶性總蛋白*制備試劑盒20次大鼠脫氫表雄酮S7（DHEA-S7）ELISA試劑盒,
植物組織可溶性疏水總蛋白制備試劑盒20次大鼠C反應(yīng)蛋白（CRP）ELISA試劑盒,
植物組織可溶性親水總蛋白制備試劑盒20次大鼠D2（VD2）ELISA試劑盒,
植物組織可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次瓊脂用于分離培養(yǎng)
植物組織可溶性總核蛋白高純制備試劑盒10次D-組
植物組織可溶性膜蛋白粗提制備試劑盒20次還原Ⅰ二鈉鹽
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