詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產品名稱:子宮頸表皮癌細胞;MS751
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9893
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
VSV-G tag/FITC 熒光素標記VSV-G tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 細胞角蛋白1/8/19抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠抗3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內參抗體) GAPDH 0.1ml
Syntaxin 6 英文名稱: 突觸融合蛋白6抗體 0.2ml
phospho-ERF (Thr526) 英文名稱: 磷酸化轉錄因子ERF抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Gab1 (Tyr627) 磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體 規(guī)格 0.1ml
CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 細胞角蛋白1/8/19抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
phospho-Akt(Thr450) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化蛋白激酶B抗體(蘇磷酸化位點:450)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Chicken IgM (親和純化) 雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
丙型肝炎病毒-NS1抗體 HCV-NS1 0.2ml
名 價 格(RMB)
TCRP1 英文名稱: 舌癌療耐藥相關蛋白1 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Ser417) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Chicken IgM (親和純化) 雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
Goat rabbit IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的羊抗兔IgG 0.1ml
phospho-FOXO4 (Thr451) 英文名稱: 磷酸化叉頭蛋白4抗體 0.1ml
成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8抗體 FGF-8/HBGF-8 0.1ml
Phospho-FAK (Tyr407) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STXBP1(Ser515) 磷酸化神經突觸前膜胞內蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit chicken IgM/Gold 金標記兔抗雞IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
子宮頸表皮癌細胞;MS751頡(VALINE)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析試劑盒人脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒, LBP ELISA
名稱規(guī)格人血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒,
細胞內核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)比色法測定試劑盒20次人協同分子受體(CMR)ELISA試劑盒,
細胞內核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)流式細胞分析試劑盒10次人上皮中性?;罨?8(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒,
核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA分析試劑盒48/96次人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒,
凍切片核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)熒光染色測定試劑盒10次人抗風疹病IgM抗體(anti-RV IgM)ELISA試劑盒,
石蠟切片核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)熒光染色測定試劑盒10次人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒,
核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒,
細胞內核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)比色法測定試劑盒20次小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒,
細胞內核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG流式細胞分析試劑盒10次小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒,
核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)ELISA分析試劑盒48/96次小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA試劑盒,
凍切片核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)熒光染色測定試劑盒10次小鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒,
石蠟切片核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)熒光染色測定試劑盒10次小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒,
核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒,
細胞內核酸氧化8-氧鳥苷(8-oxo-G)比色法測定試劑盒20次小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒,