激活蛋白C(APC)重組蛋白 返回列表頁

公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

特點：

標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記：熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

產(chǎn)品名稱：激活蛋白C(APC)重組蛋白   

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Activated Protein C (APC)

酶與激酶

血液病學(xué)

相關(guān)產(chǎn)品：
腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(APRT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Adenine Phosphoribosyltransferase (APRT)Homo sapiens (Human，人)

小泛素相關(guān)修飾蛋白1(SUMO1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Small Ubiquitin Related Modifier Protein 1 (SUMO1)Homo sapiens (Human，人)

小泛素相關(guān)修飾蛋白2(SUMO2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Small Ubiquitin Related Modifier Protein 2 (SUMO2)Homo sapiens (Human，人)

小泛素相關(guān)修飾蛋白3(SUMO3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Small Ubiquitin Related Modifier Protein 3 (SUMO3)S. cerevisiae (Yeast，酵母)

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后

 的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

DNA Polymerase epsilon產(chǎn)品名稱: DNA聚合meiε/DNA pol ε抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

CCL21產(chǎn)品名稱: 淋巴細(xì)胞趨化因子CCL21/Exodus 2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit

CD238產(chǎn)品名稱: 凱爾型糖蛋白CD238抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit

NDUFS6產(chǎn)品名稱: NDUFS6蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

ICOS產(chǎn)品名稱: 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig

KLK13產(chǎn)品名稱: 激肽釋放mei13抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

Orexin Prepro產(chǎn)品名稱: 食欲su前體蛋白OX抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

dal產(chǎn)品名稱: 胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白dal抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

NDST4產(chǎn)品名稱: NDST4蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

NIN產(chǎn)品名稱: GSK3B相互作用蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
激活蛋白C(APC)重組蛋白人p21蛋白激活激mei4(PAK4)ELISA試劑盒PAK4p21蛋白激活激mei4ELISA試劑盒Human p21 Protein Activated Kinase 4(PAK4)ELISA Kit

人O-巖藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移mei(RFNG)ELISA試劑盒RFNGO-巖藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human O-Fucosylpeptide-3-Beta-N-Acetylglucosaminyltransferase(RFNG)ELISA Kit

人O-唾液suan糖蛋白內(nèi)肽mei(OSGEP)ELISA試劑盒OSGEPO-唾液suan糖蛋白內(nèi)肽meielisa檢測試劑盒Human O-Sialoglycoprotein Endopeptidase(OSGEP)ELISA Kit

人Otubain人2蛋白(OTUB2)ELISA試劑盒OTUB2Otubain2蛋白elisa kitHuman Otubain 2(OTUB2)ELISA Kit

人Otubain人1蛋白(OTUB1)ELISA試劑盒OTUB1Otubain1蛋白ELISA試劑盒Human Otubain 1(OTUB1)ELISA Kit