腺苷酸環(huán)化酶5(ADCY5)重組蛋白

公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：腺苷酸環(huán)化酶5(ADCY5)重組蛋白   

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 5 (ADCY5)

Adenylate cyclase type V; ATP pyrophosphate-lyase 5

酶與激酶

代謝通路

相關(guān)產(chǎn)品：
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標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導表達成功后，表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點：

標記：標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法。

酶標記：酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成，其應用范圍非常廣泛，結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標記：熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

PSTK產(chǎn)品名稱: PSTK蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, GuineaPig

MTMR10產(chǎn)品名稱: 肌微管su相關(guān)蛋白10抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

PFKFB3/PFK2產(chǎn)品名稱: 果糖-2,6-二磷suanmei3/磷suan果糖激mei2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig

CCDC92產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit

KRT31產(chǎn)品名稱: 細胞角蛋白31抗體交叉反應: Mouse, Rat

Vitronectin產(chǎn)品名稱: 玻璃粘連蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow

PARD6G產(chǎn)品名稱: PARD6G蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit

FAM59B產(chǎn)品名稱: FAM59B蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Sheep

應用類型: Other英文名稱: Caspase-3英文別名: cleaved Caspase 3; cleaved Caspase-3; APOPAIN; CASP3; Caspase 3 apoptosis related cysteine protease; Caspase3; CPP32; CPP32B; Cysteine protease CPP32; Human cysteine protease CPP32 isoform alpha mRNA complete cds; PARP cleavage protease; SCA 1; SCA1; SREBP cleavage activity 1; Yama; CASP3_HUMAN; Caspase-3; CASP-3; Apopain; Protein Yama; SREBP cleavage activity 1; SCA-1.

Granuphilin/SYTL4產(chǎn)品名稱: 突觸結(jié)合蛋白樣蛋白4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
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