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產(chǎn)品名稱:果膠裂解酶測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào):YS-01S6687
測(cè)定意義
果膠裂解酶(EC4.2.2.10)是果膠酶的重要組成部分,是一種能降解植物細(xì)胞壁,導(dǎo)致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶,來(lái)源比較廣泛,主要來(lái)源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清,提高水果出汁率,植物病毒的純化,紙漿的漂白和紡織品的生物精煉,在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
測(cè)定原理:
果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵,生成在還原端C4和C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸,在235nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿、恒溫水浴鍋。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 磷酸化β-連環(huán)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體 Anti-BSEP 0.1ml
SESN3 英文名稱: Sestrin3抗體 0.2ml
EphA4 R 英文名稱: 酪酸蛋白激酶A4受體抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7) 磷酸化熱休克蛋白90α抗體 規(guī)格 0.1ml
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 磷酸化β-連環(huán)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Nrf2 peptide 核因子2相關(guān)因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATF2(Ser472) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格 0.1ml
IFN-r 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Ubiquitously expressed transcript 英文名稱: 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體 0.2ml
DPEP3 英文名稱: 膜二肽酶3抗體 0.2ml
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
phospho-STAT3 (Tyr705) 英文名稱: 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 0.1ml
EYA2 英文名稱: 眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體 0.2ml
造血細(xì)胞磷酸酶抗體 Anti-SHP-1 0.2ml
Anti-Tbx21/T-bet/FITC 熒光素標(biāo)記T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
果膠裂解酶測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)4,4'-二氨基二苯硫(標(biāo)準(zhǔn)品)1,6-二氫-2-甲基-6-氧代組織MAPKAP KINASE3酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
二甲氧烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))甲磺酸倍他司汀MAPKAP KINASE5酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC))尼可地爾組織MAPKAP KINASE5酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)磷酸奧司他韋MEK1酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))普瑞巴林組織MEK1酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
正庚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC))山梨MKK6酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
1-己烯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))可可堿組織MKK6酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
正己烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))地塞米松磷酸酯MSK1酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。