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魏氏無(wú)綠藻探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

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  • 型號(hào) 50T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2020-09-30 10:15:29瀏覽次數(shù):372

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書
分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) YSP7113 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
魏氏無(wú)綠藻探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱】魏氏無(wú)綠藻探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Prototheca wickerhamii
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7113
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
魏氏無(wú)綠藻探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
99%25mg25g苦草素A19666763AntiThyroidPeroxidase antibody

丹皮酚新苷 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 甘氨結(jié)合蛋白抗體 MIP-1β/CCL4 ELISA Kit 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒

Ginsenoside Rg3氨曲南標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血管動(dòng)蛋白(AMOT)Polyclonal Antibody 0.2ml

SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit  人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制子CAS號(hào):1458327過(guò)氧還蛋白檢測(cè)試盒5KUHuman/人Elisa試盒3140736

90%100mg5g筋骨草素L232791847Hepatitis A virus IgM antibody

商陸皂苷甲 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 酪氨酶受體相互作用蛋白Liprin α1抗體 PLA2G10 ELISA Kit Ⅹ組脂酶A2(PLA2G10)ELISA試劑盒

Ginsenoside Rh1氨曲南E異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血管動(dòng)蛋白樣1(AMOTL-1)Polyclonal Antibody 0.2ml

POMC(Human proopiomelanocortin) ELISA Kit  人阿黑皮素原CAS號(hào):1452000硫氧化還原蛋白檢測(cè)試盒1KUHuman/人Elisa試盒3140736

47硝基并2雜1,3二唑20mg

白果內(nèi)酯;Bilobalide 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg FGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體 MN1 ELISA Kit 腦膜瘤基因1(MN1)ELISA試劑盒

fgL2 (Fibrinogenlike 2)  凝血酶原酶 (又稱:纖維介素蛋白;前凝血素)現(xiàn)貨供應(yīng)UDP葡萄糖檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒5000668

熒光 20mg

烏頭  英文名稱:Aconitine   保存:-20℃   規(guī)格:20mg PRAM1蛋白抗體

FLIP S/L peptide  凋亡調(diào)節(jié)基之一(多肽抗原)*葡萄糖激酶檢測(cè)試盒1gHuman/人Elisa試盒5000668

DansylX琥珀酰亞20mg

三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% Tricyclazol solution

FoxP3  叉頭蛋白3T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄子(多肽抗原)進(jìn)口、分裝圓環(huán)病2型檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒5001183
魏氏無(wú)綠藻探針?lè)晒舛縋CR試劑盒鹽阿比朵爾(標(biāo)準(zhǔn)品)βEstradiol 17Cyclopentylpropionate,...1G通用試劑

阿加曲班Methanesulfonic acid sodium salt,98%25G通用試劑

阿加曲班(標(biāo)準(zhǔn)品)Indan1,2dione,98%1G通用試劑

醋精氨加壓素Indan1,2dione,97%1G通用試劑

阿替洛爾4Benzylamino7nitro2,1,3benzoxadia...500MG通用試劑

阿替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)N(4Aminobutyl)Nethylisoluminol,≥90%25MG通用試劑

阿托伐他汀鈣Ruthenium Red,95%100MG通用試劑

阿托伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Astaxanthin (HPLC,≥98%)100MG通用試劑

阿扎胞苷/5氮雜胞嘧啶核苷(進(jìn)分)Dehydroascorbic acid250MG通用試劑

5氮胞苷/阿扎胞苷/5氮雜胞嘧啶核苷2Acrylamido2methyl1propanesulfoni...100G通用試劑

5氮胞苷/阿扎胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)3Isocyanatopropyltrimethoxysilane25G通用試劑

鹽氮卓斯汀6Bromohexanoic acid,97%5G通用試劑

鹽氮卓斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Phenazine ethosulfate,≥95%1G通用試劑

阿奇5Aminovaleric acid5G通用試劑

阿奇(標(biāo)準(zhǔn)品)3Hydroxybutyric acid1G通用試劑

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