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皺褶青霉探針法熒光定量PCR試劑盒

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  • 型號 50T
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  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2020-09-30 09:45:46瀏覽次數(shù):278

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 YSP7066 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
皺褶青霉探針法熒光定量PCR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。

詳細(xì)介紹

【產(chǎn)品名稱】皺褶青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Penicillium rugulosum
【產(chǎn)品編號】YSP7066
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
皺褶青霉探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
98%25g1g赤式2(4基2,6二基基)1(4羥基3基基)1醇57160471zonula occluden1

3-(N-乙酰-L-半胱氨-S-基)對乙酰氨基酚鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:國進(jìn)口 3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen Sodium Salt 人直腸粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

 Madecassoside蒿相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人精氨脫羧酶(ADC)ELISA試劑盒 0.2ml

MN(Human Mannose) ELISA Kit  人甘露糖CAS號:1026353207 還原型抗壞血檢測試盒500mgHuman/人Elisa試盒3107344

98%25g5g醉椒素72962437Occludin

羅硝唑 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR Ronidazole 化高鐵血紅蛋白參比液(4種×2套) /Cyanomethemoglobin reference solution10毫升×8支國產(chǎn)/進(jìn)口

Asiatic acid青蒿琥酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人軸抑制蛋白2(Axin-2)ELISA試劑盒 0.2ml

MR(Human mannose receptor) ELISA Kit  人甘露糖受體CAS號:102625649 谷胱甘肽過氧化物酶檢測試盒100mgHuman/人Elisa試盒3635

3基7羥基香豆素5mg

辛硫標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%) 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%  Phoxim solution

AQP2 (aquaporin Protein2)  水通道蛋白2(抗原)*抗精子抗體檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒496468

熒光素二鈉鹽5mg

 補(bǔ)體成分2(C2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Complement Component 2 (C2)

ABCA1(ATP binding cassette transporter A1)  腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原進(jìn)口、分裝BMP結(jié)合內(nèi)皮調(diào)節(jié)子檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒4964710

98%100g100ml胃蛋白酶(豬胃粘膜)Epigen

辛硫標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6% Phoxim solution

ABCG1 peptide  三腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原進(jìn)口、原裝尿白蛋白檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒4964710
皺褶青霉探針法熒光定量PCR試劑盒遠(yuǎn)志皂苷B CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

藤黃 CAS號: 2752650 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢

構(gòu)樹堿A CAS號: 173220070 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

11羥柳杉 CAS號: 88664088 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

3β酰氧7,25甘遂二24 CAS號: 1352001092 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

林澤蘭內(nèi)C CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

林澤蘭內(nèi)B CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

蒲公英甾 CAS號: 6426433 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

15羥松香 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

金合歡素;刺槐素 CAS號: 480444 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

大黃8O葡萄糖苷 CAS號: 13241286 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

正酞;酞內(nèi) CAS號: 6066495 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg 訂購|咨詢

澳洲茄;澳州茄 CAS號: 126170 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

扁蓄苷 CAS號: 572305 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

7表紫杉 CAS號: 105454044 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

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