三叉奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

三叉奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

實(shí)驗(yàn)步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】三叉奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱(chēng)】Ostertagia trifurcata
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7037
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè)，所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀，可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線(xiàn)判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR（Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板，擴(kuò)增β-actin基因，與同類(lèi)產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng)，擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
三叉奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟	溫度	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	94℃	5   min	1
變性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
終延伸	72℃	5   min	1

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
98%100g250mg別育享賓76639946Adipsin

［4-（3-氨基）-3-磺酰 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 50mg 載脂蛋白M抗體 pMHC ELISA Kit 肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

人白介素1α (IL1α )RFPL2/RFPL3  RET指蛋白樣2/3抗體規(guī)格:96T/48TAntazoline Phosphate規(guī)格:200mgMEK激酶檢測(cè)試盒20mg人晶體上皮細(xì)胞永生系，SRA01/04細(xì)胞1x10^6cells

98%500g1g6羥基奈酚 3蕓香糖6葡萄糖苷54238516Procalcitonin

糖精鈉-對(duì)照品;有報(bào)告 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 250mg 肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶2抗體 MUC4 ELISA Kit 粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (His 標(biāo)簽)*1000(g)

人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL1sRⅡ)RFPL4A/RNF210  環(huán)指蛋白210抗體規(guī)格:96T/48TAnthralin規(guī)格:1gMEST檢測(cè)試盒20mg人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCIH1688細(xì)胞1x10^6cells

97%瓶25gα淀粉酶（枯草桿）Lupus anticoagulant

膽維他;Anethole trithio 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 20mg 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 ORM2 ELISA Kit 類(lèi)粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒

ADM (Adrenomedullin)(2252)  上腺髓質(zhì)素（2252）進(jìn)口、原裝心鈉肽檢測(cè)試盒10gHuman/人Elisa試盒493572

97%10瓶/盒100g胰凝乳蛋白酶（豬）HBcAbIgM

7-表紫杉醇 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 30mg 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體 BP ELISA Kit 大皰性類(lèi)天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒

ADM (Adrenomedullin)(2242)  上腺髓質(zhì)素（2242）現(xiàn)貨供應(yīng)Ⅱ型膠原抗體檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4936474

97%500g250mg胰凝乳蛋白酶（豬）HeparinPF4 complex；HIT Antibody

氨甲 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 100mg 人皮質(zhì)素受體5(MC5-R)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒，英文名：AGEs ELISA Kit

Sterile Defidrinated Sheep BloodBRBK病IgMkan抗體檢測(cè)試盒20mg促上腺皮質(zhì)激素檢測(cè)試盒Oxytocinreceptor
三叉奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒檳榔堿 CAS號(hào)： 300083 規(guī)格： HPLC≥98%;50mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

別隱品堿 CAS號(hào)： 485916 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

3表中國(guó)臺(tái)灣三尖杉?jí)A CAS號(hào)： 39024152 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

半枝蓮堿 CAS號(hào)： 176520131 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

白芷屬腦 CAS號(hào)： 31575936 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

Α波菜甾 CAS號(hào)： 481185 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

貝萼皂苷元 CAS號(hào)： 6989248 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

白花前胡素 CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

扁柏雙黃 CAS號(hào)： 19202369 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

阿彼斯姆素 CAS號(hào)： 103529948 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

澳茄新堿 CAS號(hào)： 27028768 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

7氨4香素 CAS號(hào)： 26093312 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

9氨喜樹(shù)堿 CAS號(hào)： 91421431 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

阿馬堿 CAS號(hào)： 483045 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

阿奇 CAS號(hào)： 83905015 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)