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毛霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

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  • 型號(hào) 50T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2020-09-29 10:33:43瀏覽次數(shù):287

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) YSP6939 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
毛霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

詳細(xì)介紹

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

【產(chǎn)品名稱(chēng)】毛霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱(chēng)】Mucor spp.
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6939
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線(xiàn)判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類(lèi)產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
毛霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
98%5g10MG3香葉基5,7,2',4'四羥基黃111900RSV Antigen

黃體 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 100mg 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體 IFN-γ ELISA Kit γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

Oridonin腺苷標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人α-淀粉酶1(Alpha-amylase 1)Polyclonal Antibody 0.2ml

人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)UBE2U  泛素蛋白連接酶U抗體規(guī)格:96T/48T5Adenylic Acid規(guī)格:125mgATP酶檢測(cè)試盒20mg人膽管癌細(xì)胞,QBC939細(xì)胞1x10^6cells

98%25g5g5'香葉基5,7,2',4'四羥基黃111773Erythrocyte transketolase

8-姜酚;8-Gingerol 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 20mg 轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 Cortisol ELISA Kit 皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒

Coenzyme Q10聯(lián)氨標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人膜聯(lián)蛋白A6(ANXA6)Polyclonal Antibody 0.2ml

MMP2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶ACAS號(hào):113520 花青素合成酶檢測(cè)試盒50THuman/人Elisa試盒3034524

OligoGreen(效果同OliGreen)ssDNA 定量檢測(cè)試劑 *2000次*5mg

氧化鉍 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99% Bismuth oxide  小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):MLTC-1

Human Fibrinogen  (親和純化)人纖維蛋白原現(xiàn)貨供應(yīng)抗核糖體P蛋白抗體檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒477600752

香柑內(nèi),5基補(bǔ)骨脂素OligoGreen(效果同OliGreen)ssDNA 定量檢測(cè)試劑 *2000次*5mg

無(wú)水鈉(for HPLC,≥99.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T) Sodium sulfate anhydrous

human IgM  (免疫親和純化)人IgM*載脂蛋白E2檢測(cè)試盒10gHuman/人Elisa試盒4780794

順式和反式, 97%100mg1g低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)檢測(cè)試劑盒(Sol比色法)gonadotropinreleasing hormone

 PC-3M(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Xylose Lysine Desoxycholate Agar250酰硫氨檢測(cè)試盒5mg程序性死亡分子1檢測(cè)試盒Rotavirus
毛霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒利血平;Alserin CAS號(hào): 50555 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

長(zhǎng)春質(zhì)堿;Catharanthine CAS號(hào): 70674907 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

蓮心堿;Liensinine CAS號(hào): 2586961 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

櫟櫻;Roburic acid CAS號(hào): 6812813 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

鄰氧肉桂;2Methoxycin CAS號(hào):  規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

雷帕;Sirolimus CAS號(hào): 53123889 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

落干;Loganic acid CAS號(hào): 22255409 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

長(zhǎng)春新堿;Vincristine S CAS號(hào): 2068782 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

蘆薈大黃素;Aloeemodin CAS號(hào): 481721 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

連翹苷B;Forsythoside B CAS號(hào): 81525135 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

連翹苷A;Forsythoside A CAS號(hào): 79916771 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

辣椒素;Capsaicin CAS號(hào): 2444464 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

連翹苷;Forsythin CAS號(hào): 487412 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

魯斯可皂苷元;Ruscogenin CAS號(hào): 472117 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

蘆薈苷;barbaloin CAS號(hào): 1415732 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

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