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詳細介紹
產(chǎn)品名稱：小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10269
細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常
儲存條件：2℃-8℃，避光儲存
運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟：
一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。
細胞特性：
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
NAIF1 protein/FITC 熒光素標記核凋亡誘導因子蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
V5 tag/FITC 熒光素標記V5 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
alpha-2腎上腺素能受體抗體 ADRA2 1ml
Mouse Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗羊IgG 0.3ml
GLUT8 英文名稱： 葡萄糖轉運蛋白8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Proteasome 20S alpha 7 蛋白酶體PSMα7抗體 規(guī)格 0.2ml
V5 tag/FITC 熒光素標記V5 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CK-20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人細胞角蛋白20Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MEP1A/Meprin alpha/PPHA 甲酸肽水解酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Gal-6S(Human galactose-6-sulphate sulphatase) ELISA Kit 人半乳糖6酯酶 96T
RRM2 英文名稱： 核糖核苷酸還原酶亞基R2抗體 0.1ml
C1orf77 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框77抗體 0.2ml
Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse rat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗大鼠IgG 0.3ml
G Protein alpha Inhibitor 1 英文名稱： G蛋白α抑制蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh 5HTR2C 5-羥色胺受體2C抗體 規(guī)格 0.2ml
MPO /FITC 熒光素標記髓過氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PTN/Pleiotrophin 多效生長因子抗體 規(guī)格 0.1ml
TTF-2/FITC 熒光素標記甲狀腺轉錄因子-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒家族受體α-4抗體流式組化
腸出血性大腸埃希菌（Enterohaemorrhagic E. coli）鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒20次磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體流式組化
腸致病性大腸桿菌（Enteropathogenic E. coli）鑒定20次癌易感基因相關蛋白2
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒CD90抗體流式組化
腸集聚型大腸埃希菌（Enteroaggregative E. coli）鑒定20次L-谷二乙酯鹽酸鹽
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒D-半胱
腸侵襲性大腸桿菌（Enteroinvasive E. coli ）鑒定20次牛血紅蛋白
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒γ-球蛋白（牛）
副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus）鑒定20次頭孢曲松鈉
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒環(huán)孢菌素A
霍亂弧菌（Vibrio cholerae）鑒定20次2′-脫氧肌苷
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒羥丙基-β-環(huán)糊精
耶爾森氏菌屬（Yersinia）鑒定20次羧甲基纖維素CM-32
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒甲脒瓊脂糖凝膠4FF
沙門氏菌（Salmonella）鑒定20次亞精
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