MM96L*操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

資源名稱

MM96L*

種屬  人黑色素瘤細(xì)胞

提供形式  P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  90%高糖DMEM+10%FBS

生長條件  95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

生長特性  貼壁生長

存儲條件  50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

詳細(xì)說明

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長期儲存。

冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降

1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

MM96L*注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。CAS50-81-7 抗壞血酸 25g

CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g

CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g

CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g

CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg

CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg

CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg

CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g

CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g

CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g

CAS50-69-1 D- 核糖 5g

CAS50-69-1 D- 核糖 5g

CAS50-69-1 D- 核糖 5g

CAS504-15-4 苔黑素 5g

CAS504-15-4 苔黑素 5g

CAS504-15-4 苔黑素 5g

CAS50-02-2 地塞米松 100mg

CAS50-02-2 地塞米松 100mg

CAS50-02-2 地塞米松 100mg

CAS50-01-1 鹽酸胍 100g

CAS50-01-1 鹽酸胍 100g

CAS50-01-1 鹽酸胍 100g

CAS493-52-7 甲基紅 5g

CAS493-52-7 甲基紅 5g

CAS493-52-7 甲基紅 5g

CAS485-47-2 茚三酮 10g

CAS485-47-2 茚三酮 10g

CAS485-47-2 茚三酮 10g

CAS477-73-6 番紅 O 5g

CAS477-73-6 番紅 O 5g

CAS477-73-6 番紅 O 5g

CAS4618-18-2 乳果糖 1g

CAS4618-18-2 乳果糖 1g

CAS4618-18-2 乳果糖 1g

CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g

CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g

CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g

CAS4431-00-9 金精三羧酸 5g

CAS4431-00-9 金精三羧酸 5g

CAS4431-00-9 金精三羧酸 5g

CAS4404-43-7 熒光增白劑 28 1g

CAS4404-43-7 熒光增白劑 28 1g