Pan02-CAG-tTA-3E6現(xiàn)貨供應操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 Pan02-CAG-tTA-3E6現(xiàn)貨供應
種屬  tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞（B類）

形態(tài)  多角

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS+2.0ug/mlpuromycin

生長特性  貼壁生長

詳細說明

描述  轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒，經(jīng)2.0ug/mlpuromycin篩選，為Tet-off穩(wěn)定調(diào)控細胞系，受強力霉素Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細胞倍增時間為24小時。

支原體檢測  培養(yǎng)法（-）

使用權限  B類

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

Pan02-CAG-tTA-3E6現(xiàn)貨供應注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。100807-100    杜氏 PBS 緩沖液 ,10×    100mL
90707-50    動植物總蛋白微量提取試劑盒    50 次
D013-1    動植物種屬鑒定    1 個樣
91204-50    動植物膜蛋白微量制備試劑盒    50 次
131128F-100    動物種屬鑒定 PCR Mix 6    100 次
131128E-100    動物種屬鑒定 PCR Mix 5    100 次
131128D-100    動物種屬鑒定 PCR Mix 4    100 次
131128C-100    動物種屬鑒定 PCR Mix 3    100 次
131128B-100    動物種屬鑒定 PCR Mix 2    100 次
131128A-100    動物種屬鑒定 PCR Mix 1    100 次
130891-50    動物線粒體總蛋白提取劑盒    50 次
111207B-15    動物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )    15 次
111207A-15    動物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )    15 次
80807B-50    動物細胞裂解液 B    50mL
80807A-50    動物細胞裂解液 A    50mL
90613-25    動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    25 次
90613-100    動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    100 次
21-0050-5    動物上皮細胞生長因子    5mL
3070-100    動物 RNAout(TRIzol)     100mL
3070-250    動物 RNAout(TRIzol)     250mL
3670-100    動物 DNAout    100mL
3670-250    動物 DNAout    250mL
131204-10    動態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量試劑盒    1.7mL×10 支
131203-48    動態(tài)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒    48 次
130809-1    定影粉    1袋
CAS9001-08-5    丁酰膽堿酯酶    500U
CAS156-54-7    丁酸鈉    1g
130427-50    丁基硫介質(zhì)    50mL
130426-50    丁基介質(zhì)    50mL
CAS26628-22-8    疊氮鈉    25g
130812-24    凋亡 DNAout    24 次