FBS胎牛血清解凍方法可使用國際上推薦的三步法融化解凍,可盡可能減少沉淀出現(xiàn),保留血清中因子的活性。
要點一:此三步融化法,適用于所有血清,在水浴過程中,血清的平面要盡量浸在水中,但瓶口不要沒入水中,防治瓶口污染。在融化過程中要經(jīng)常慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動不要劇烈,盡量不要產(chǎn)生泡沫!
要點二:如果你的血清平時是儲存在-80℃的血清,融化前則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中復溫(至少24小時),再使用三步法溶解,避免溫差過大,更易導致血清中蛋白凝集。
要點三:為**限度保留血清中因子的活性,減少凍融次數(shù),血清應遵循現(xiàn)用現(xiàn)配,現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則。解凍的血清,應根據(jù)實驗需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。分裝好的血清,密封好后,立即放回-20℃冰箱繼續(xù)冷凍儲存。需要配制培養(yǎng)基的時候,再從-20℃冰箱中取出一管來盡快解凍使用(能全部配成培養(yǎng)基,不要有剩余),配好的培養(yǎng)基在4℃冰箱儲存不超過一周。